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J-GLOBAL ID：201803004845465615

抗原特異的モノクローナル抗体作製方法

Inventor： 黒澤 信幸 ,  磯部 正治
Applicant, Patent owner： 国立大学法人富山大学
Agent (1)： 特許業務法人特許事務所サイクス
Gazette classification：再公表公報
Application number (International application number)：JP2016073664
Publication number (International publication number)：WO2017026532
Application date： Aug. 10, 2016
Publication date： Feb. 16, 2017
Summary：

本発明は、抗体産生細胞を含む細胞群を、架橋剤で固定化処理し(架橋剤は、細胞膜透過性を持つ可逆的な架橋剤)、固定化処理された細胞群を、界面活性剤で細胞膜溶解処理し、この細胞群と標識目的抗原とを反応させ、染色した細胞群において、標識目的抗原と反応した少なくとも1個の細胞を分離する、目的抗原特異的モノクローナル抗体の産生能を有する細胞の分離方法に関する。本発明は、この方法で分離した細胞からmRNAを分離し、cDNAを調製し、調製したcDNAから抗原特異的モノクローナル抗体またはその断片を調製する、目的抗原特異的モノクローナル抗体の作製方法にも関する。目的抗原特異的モノクローナル抗体の産生能を有する少なくとも1個の細胞を、高い精度で分離できる方法、及びこの方法で分離された細胞を用いる目的抗原特異的モノクローナル抗体を作製可能な方法が提供される。本発明は、新規なトレオニン18リン酸化p53(pT18-p53)特異的モノクローナル抗体及びトレオニン68リン酸化CHK2(pT68-CHK2)特異的モノクローナル抗体を提供する。

Claim (excerpt)：

(1)抗体産生細胞を含む細胞群を、架橋剤で固定化処理する工程(固定化工程)、但し、前記架橋剤は、細胞膜透過性を持つ可逆的な架橋剤である、 (2)固定化処理された細胞群を、界面活性剤で処理する工程(細胞膜溶解工程)、 (3)細胞膜溶解処理された細胞群と標識した目的抗原(以下、標識目的抗原)とを反応させる工程(染色工程)、 (但し、細胞膜溶解工程(2)と染色工程(3)とは、順次実施することも、並行して実施することもできる。) (4)染色工程を経た細胞群において、標識目的抗原と反応した少なくとも1個の細胞を分離する工程(細胞単離工程)。 を含む、目的抗原特異的モノクローナル抗体の産生能を有する細胞の分離方法。

IPC (3)：

C12N 1/02 ,  C12P 21/08 ,  C07K 16/00

FI (3)：

C12N1/02 ,  C12P21/08 ,  C07K16/00

F-Term (24)：

4B064AG27 ,  4B064CA19 ,  4B064CC22 ,  4B064CC24 ,  4B064CE13 ,  4B064DA01 ,  4B064DA13 ,  4B065AA90X ,  4B065BD50 ,  4B065CA44 ,  4B065CA46 ,  4H045AA11 ,  4H045BA10 ,  4H045BA12 ,  4H045BA15 ,  4H045BA16 ,  4H045BA18 ,  4H045CA40 ,  4H045DA76 ,  4H045EA20 ,  4H045EA22 ,  4H045EA50 ,  4H045FA72 ,  4H045FA74