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J-GLOBAL ID:202103019793001758
抗原特異的モノクローナル抗体作製方法
Inventor:
,
Applicant, Patent owner:
Agent (1):
特許業務法人特許事務所サイクス
Gazette classification:特許公報
Application number (International application number):2017534496
Patent number:6829469
Application date: Aug. 10, 2016
Claim (excerpt):
【請求項1】(1)抗体産生細胞を含む細胞群を、架橋剤で固定化処理する工程(固定化工程)、但し、前記架橋剤は、細胞膜透過性を持つ可逆的な架橋剤である、
(2)固定化処理された細胞群を、界面活性剤で処理して細胞膜を溶解する工程(細胞膜溶解工程)、
(3)細胞膜溶解処理された細胞群と標識した目的抗原(以下、標識目的抗原)とを反応させ、細胞内で染色する工程(染色工程)、
(但し、細胞膜溶解工程(2)と染色工程(3)とは、順次実施することも、並行して実施することもできる。)
(4)染色工程を経た細胞群において、標識目的抗原と反応した少なくとも1個の細胞を単離する工程(細胞単離工程)、
(5)少なくとも1個の単離された細胞を脱架橋処理することにより、少なくとも1個の単離された細胞からmRNAを分離し、cDNAを調製する工程(cDNA調製工程)、および
(6)cDNA調製工程で調製したcDNAから目的抗原に特異的なモノクローナル抗体またはその断片を調製する工程(目的抗原特異的モノクローナル抗体調製工程)
を含む、少なくとも1個の単離された細胞から目的抗原特異的モノクローナル抗体を製造する方法。
IPC (4):
C12N 1/02 ( 200 6.01)
, C12P 21/08 ( 200 6.01)
, C07K 16/00 ( 200 6.01)
, C12N 15/13 ( 200 6.01)
FI (4):
C12N 1/02 ZNA
, C12P 21/08
, C07K 16/00
, C12N 15/13
Article cited by the Patent:
Cited by examiner (3)
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"Rapid production of antigen-specific monoclonal antibodies from a variety of animals."
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"RNA Isolation from FFPE Samples User Manual NucleoSpin FFPE RNA"
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"Novel method for the high-throughput production of phosphorylation site-specific monoclonal antibod
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