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J-GLOBAL ID：202203015459298180

マウス大腸蟯虫の検出方法

Inventor：
水上 洋一

About 水上 洋一

, 
諌山 慧士朗

About 諌山 慧士朗


Applicant, Patent owner：
国立大学法人山口大学

About 国立大学法人山口大学


Agent (10)： 廣田 雅紀 ,  廣田 鉄平 ,  小澤 誠次 ,  東海 裕作 ,  堀内 真 ,  山内 正子 ,  園元 修一 ,  山村 昭裕 ,  富田 博行 ,  篠田 真希恵
Gazette classification：公開公報
Application number (International application number)：2020118717
Publication number (International publication number)：2022015698
Application date： Jul. 09, 2020
Publication date： Jan. 21, 2022
Summary：
【課題】比較的簡便にマウス由来の糞試料を調製でき、かつ、当該糞試料中に含まれるマウス大腸蟯虫由来のゲノムDNAを感度よく定量的に検出できる方法やキットを提供すること。 【解決手段】マウスの糞からアルコール沈殿処理により糞試料を調製し、マウス大腸蟯虫リボソームDNA由来ITS-2領域のDNAを特異的に増幅するLNA含有プライマーセットと、当該領域のDNAに特異的にハイブリダイズし、蛍光物質及びクエンチャー物質で標識されたLNA含有プローブとを用いたPCRを行う。 【選択図】なし
Claim (excerpt)：
以下の工程(a)~(c)を含むことを特徴とする、マウス大腸蟯虫の検出方法。 (a)被験マウスの糞を含む液を、ビーズ存在下でホモジナイズ処理した後、アルコール沈殿処理を行うことにより糞試料を調製する工程; (b)調製した糞試料と、以下のプライマーセット(i)及びプローブ(ii)とを用いてPCR(Polymerase Chain Reaction)を行う工程; (i)配列番号1に示されるヌクレオチド配列と少なくとも90%の同一性を有する、マウス大腸蟯虫のリボソームDNAにおけるITS-2(Internal Transcribed Spacer 2)領域のDNAを増幅可能なプライマーセットであって、1又は2以上のLNA(locked nucleic acid)を含むフォワードプライマーと、1又は2以上のLNAを含むリバースプライマーとからなる、前記プライマーセット (ii)前記プライマーセットにより増幅される、マウス大腸蟯虫のリボソームDNAにおけるITS-2領域のDNAにハイブリダイズするプローブであって、5’末端が蛍光物質で標識され、3’末端がクエンチャー物質で標識され、かつ、1又は2以上のLNAを含む、前記プローブ (c)蛍光物質由来の蛍光シグナルを検出する工程;
IPC (2)：
C12Q 1/686 ,  C12Q 1/688
FI (2)：
C12Q1/686 Z ,  C12Q1/6888 Z
F-Term (18)：
4B063QA01 ,  4B063QA13 ,  4B063QA18 ,  4B063QA19 ,  4B063QQ03 ,  4B063QQ28 ,  4B063QQ42 ,  4B063QQ52 ,  4B063QR08 ,  4B063QR32 ,  4B063QR35 ,  4B063QR55 ,  4B063QR56 ,  4B063QR62 ,  4B063QS25 ,  4B063QS32 ,  4B063QS34 ,  4B063QX02
Patent cited by the Patent：
Cited by applicant (2)
Article cited by the Patent：
Cited by examiner (7)
  • Veterinary Parasitology, 2008, Vol.153, p.379-383
  • 日本分子生物学会年会講演要旨集, 2019, Vol. 第42回, #2P-0671
  • 腸内細菌学雑誌, 2006, Vol.20, p.259-262
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