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J-GLOBAL ID：202203017349001401

無細胞系でDNAを編集する方法

Inventor： 末次 正幸 ,  俵木 彩子 ,  加納 巧希
Applicant, Patent owner： オリシロジェノミクス株式会社
Agent (4)： 及川 周 ,  大槻 真紀子 ,  服部 映美 ,  小林 淳一
Gazette classification：特許公報
Application number (International application number)：9029793
Patent number：7025552
Application date： Jul. 30, 2019
Claim (excerpt)：

【請求項1】 無細胞系でDNAを編集する方法であって、以下の工程: (1)無細胞系において、DNAの標的部位に欠失、置換、又は付加を導入する工程;及び (2)工程(1)において欠失、置換、又は付加が導入されたDNAを、無細胞系において増幅させる工程、ここで当該DNAは、20°C~80°Cの範囲の温度でインキュベートする温度条件下で増幅される;を含み、 前記工程(1)が、以下の工程: 欠失、置換、又は付加の導入用一本鎖DNAの存在下で、環状DNAの複製反応を行う工程、ここで当該一本鎖DNAは、複製反応の条件下で当該環状DNAの標的部位にハイブリダイズし得る;を含み、前記環状DNAの複製反応を行う工程が、以下の工程:(a)環状DNAの複製を触媒する第一の酵素群、(b)岡崎フラグメント連結反応を触媒して、カテナンを形成する2つの姉妹環状DNAを合成する第二の酵素群、及び(c)2つの姉妹環状DNAの分離反応を触媒する第三の酵素群を含む反応溶液と、前記一本鎖DNAと、前記環状DNAとの反応混合物を調製する工程;並びに前記反応混合物を、20°C~80°Cの範囲の一定の温度でインキュベートするか、又は65°C以下の2つの温度でのインキュベーションを繰り返す温度サイクル下でインキュベートする工程;を含む、前記方法。

IPC (2)：

C12N 15/10 ( 200 6.01) ,  C12Q 1/6844 ( 201 8.01)

FI (2)：

C12N 15/10 200 Z ,  C12Q 1/684 ZNA Z