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J-GLOBAL ID：200902275810991926   整理番号：07A1207859

発現ベクターpET32a/His MBL-CLRの構築とE.coliにおける発現

Construction of the expression vector pET32a/His MBL-CLR and its expression in E.coli

著者 (5件)： CAI Xuemin (Dep. of Immunology;Southern Medical Univ., Guangzhou) ,  ZUO Daming (Dep. of Immunology;Southern Medical Univ., Guangzhou) ,  ZHAO Na (Dep. of Immunology;Southern Medical Univ., Guangzhou) ,  ZHANG Liyun (Dep. of Immunology;Southern Medical Univ., Guangzhou) ,  CHEN Zhengliang (Dep. of Immunology;Southern Medical Univ., Guangzhou)
資料名： Xibao yu Fenzi Mianyixue Zazhi  (Xibao yu Fenzi Mianyixue Zazhi)
巻： 23  号： 1  ページ： 25-27,31  発行年： 2007年 
JST資料番号： C2523A  ISSN： 1007-8738  CODEN： XFMZFM  資料種別： 逐次刊行物 (A)
記事区分： 原著論文  発行国： 中国 (CHN)  言語： 中国語 (ZH)

抄録/ポイント： (目的)pET32a/His MBL-CLR組換え原核性発現プラスミドを構築し,E.coliにマンナン結合レクチン-コラーゲン様受容体(MBL-CLR)蛋白質を発現させる。(方法)ヒトMBL-CLRをpGEM-MBLプラスミドからPCRで増幅し,原核性細胞発現ベクターpET32aに挿入した。制限マッピングとシーケンシングで同定後,組換えプラスミドpET32a/His MBL-CLRをE.coli BL21(DE3)細胞に入れた。発現産物はクロマトグラフィ精製し,SDS-PAGE,ウエスタンブロット,および組換えヒトMBL蛋白質で免疫感作したBALB/cマウスからの抗体を用いた間接ELISAで同定した。(結果)180bpのcDNAフラグメントをpGEM-MBLプラスミドから増幅し,組換え発現ベクターpET32/His MBL-CLRを構築した。組換えプラスミドは制限マップとシーケンスから予測されたものと一致した。精製組換え産物である融合蛋白質3成分(分子量30000,60000,120000)がSDS-PAGEで検出され,ウェスタンブロットアッセイで抗His抗体により認識できた。精製組換え産物は間接ELISAにおける組換えヒトMBL蛋白質に対する抗体と反応できた。(結論)組換えヒトMBL-CLRおよび組換えヒトMBL-CLR-Trx融合蛋白質を効率的に発現する原核性発現株を得ることができた。Data from the ScienceChina, LCAS. Translated by JST

シソーラス用語： ベクター ,  *Escherichia ,  *プラスミド ,  *レクチン ,  マンナン ,  *融合タンパク質 ,  抗原抗体反応 ,  *コラーゲン ,  遺伝子導入 ,  原核生物 ,  遺伝子発現
準シソーラス用語： Escherichia coli ,  *MBL ,  組換融合蛋白質

分類 (3件)： 遺伝子発現  (EC02040Q) ,  微生物の生化学  (EG03020N) ,  生理活性ペプチド  (EB08100U)

タイトルに関連する用語 (5件)： 発現ベクター ,  HIS ,  MBL ,  構築 ,  発現