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J-GLOBAL ID：201602213026268070   整理番号：15A1351115

カフェインシンターゼ遺伝子(TCS1)の原核生物発現とそのポリクローナル抗体調製と同定【Powered by NICT】

Prokaryotic Expression of Caffeine Synthase Gene(TCS1),Its Polyclonal Antibody Preparation and Identification

著者 (5件)： Deng Weiwei (State Key Lab. of Tea Plant Biology and Utilization,Anhui Agricultural Univ., Hefei) ,  Jin Yang (State Key Lab. of Tea Plant Biology and Utilization,Anhui Agricultural Univ., Hefei) ,  Li Min (State Key Lab. of Tea Plant Biology and Utilization,Anhui Agricultural Univ., Hefei) ,  Ma Linlong (State Key Lab. of Tea Plant Biology and Utilization,Anhui Agricultural Univ., Hefei) ,  Zhang Zhengzhu (State Key Lab. of Tea Plant Biology and Utilization,Anhui Agricultural Univ., Hefei)
資料名： Zhiwu Yanjiu  (Zhiwu Yanjiu)
巻： 35  号： 3  ページ： 333-339  発行年： 2015年 
JST資料番号： C2142A  ISSN： 1673-5102  資料種別： 逐次刊行物 (A)
記事区分： 原著論文  発行国： 中国 (CHN)  言語： 中国語 (ZH)

抄録/ポイント： TCS1(カフェインシンターゼ1)遺伝子のCloingと発現原核生物,抗体を調製する茶樹におけるTCS1の発現のさらなる研究のための予備的研究である。GenBankからTCS1のcDNA全長配列によると,完全なORF(オープンリーディングフレーム)を見出した。茶樹の葉のcDNAからTCS1遺伝子のオープンリーディングフレーム(ORF)を増幅した。ORFを発現ベクターpGEX-4T-2に連結した。組換蛋白質はIPTG誘導により発現させた。,in vitro酵素活性を試験し,アフィニティークロマトグラフィーにより,組換蛋白質を精製した。TCS1抗体は,精製した蛋白質と白ウサギを免疫することにより精密化した。ポリクローナル抗体の抗体価と特異性は,ELISAおよびウエスタンブロットにより確認した。条件を最適化することにより誘起された,組換蛋白質の最適発現条件は30°Cで4であった。全蛋白質の誘導後,可溶性蛋白質と封入体蛋白質は明らかな外来蛋白質ストライプを示した。ELISA検出000 1:2の抗体推奨希釈率。をウェスタンブロット法で抗体の好ましい比を検証した。原核生物発現プラスミドpGEX4T II TCS1を構築し,調製したポリクローナル抗体は,高い力価と良好な特異性を示した。Data from the ScienceChina, LCAS. Translated by JST【Powered by NICT】

シソーラス用語： 白 ,  組換タンパク質 ,  *抗体 ,  免疫 ,  プラスミド ,  タンパク質 ,  封入体 ,  in vitro実験 ,  ガラクトシド ,  チオ糖 ,  ピラノシド ,  有機硫黄化合物
準シソーラス用語： 可溶性蛋白質 ,  特異性 ,  発現ベクター ,  オープンリーディングフレーム ,  GenBank ,  *原核生物発現 , 【Automatic Indexing@JST】

分類 (2件)： 分子遺伝学一般  (EC02010J) ,  植物生態学  (EE02000E)

物質索引 (1件)： イソプロピルチオガラクトシド

タイトルに関連する用語 (7件)： カフェイン ,  シンターゼ ,  遺伝子 ,  原核生物発現 ,  ポリクローナル抗体 ,  調製 ,  同定