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J-GLOBAL ID：201602257892185074   整理番号：16A0821689

安定PASRED2-NL-LC3遺伝子の肺胞上細胞株の確立を発現【JST・京大機械翻訳】

Establishment of alveolar epithelial cell model for stably expressing PAsRed2 - N1 - LC3 gene

著者 (6件)： Fan Tao (Department of Thoracic Surgery,Renmin Hospital of Wuhan University) ,  Geng Qing (Department of Thoracic Surgery,Renmin Hospital of Wuhan University) ,  Zhang Boyou (Department of Thoracic Surgery,Renmin Hospital of Wuhan University) ,  Xu Yao (Department of Thoracic Surgery,Renmin Hospital of Wuhan University) ,  Wang Wei (Department of Thoracic Surgery,Renmin Hospital of Wuhan University) ,  Hu Hao (Department of Thoracic Surgery,Renmin Hospital of Wuhan University)
資料名： Zhonghua Shiyan Waike Zazhi  (Zhonghua Shiyan Waike Zazhi)
巻： 33  号： 1  ページ： 126-129  発行年： 2016年 
JST資料番号： C2337A  ISSN： 1001-9030  資料種別： 逐次刊行物 (A)
記事区分： 原著論文  発行国： 中国 (CHN)  言語： 中国語 (ZH)

抄録/ポイント： エネルギー安定赤色蛍光真核細胞発現ベクター(PASRED2-NL-LC3)遺伝子のラット肺胞上皮細胞(CCL149)を発現し,確立することを目的とした方法はPASRED2-NL-LC3構築,アプリケーショントランスフェクション技術CCL149細胞にこのプラスミドを導入し,安定的に発現できる細胞株をスクリーニングした。真核細胞におけるPASRED2-NL-LC3の発現を蛍光顕微鏡下で、ポリメラーゼ連鎖反応(PCR)とシークエンシング及びWESTERN BLOT法で検出し,それぞれ,安定して発現する細胞株缺Yang性オートファジーを観察した。結果は成功したことが安定的に発現PASRED2-N1-LC3の細胞株4株が得られ,CCL149PASRED 2-を倒立蛍光顕微鏡下で観察したNL-LC3蛍光組換え体の赤色率90%[(91.13±1.85)%]以上を。WESTERN BLOTの結果は低酸素条件下で実証し,CCL149PASRED 2-NL-3組換え体のLC3の相対的発現量はLC[LC3/Β-アクチン(Β-ACTIN)]は0.61670±0.03394であった,正常細胞のLC3の相対的発現量(LC3/Β-ACTIN)は0.160 00 0.006±35であった,差異は統計学の意義(P< 0.05)があった,そして実験群とLC3の発現率は対照群の平均3.854倍であった;PCR検出技術を用いてCCL149PASRED 2-NL-LC3トランスジェニック体のLC3遺伝子相対増幅量は正常CCL149細胞LC3遺伝子相対増幅量の863倍4.289である。NL-3の真核生物発現ベクターをCCL149細胞にトランスフェクションしたLCPASRED2-を,結論を用いてPASRED2-を含むことに成功しNL-LC3の安定発現細胞株を確立した。Data from the ScienceChina, LCAS.【JST・京大機械翻訳】

シソーラス用語： 真核生物 ,  オートファジー ,  蛍光 ,  プラスミド ,  トランスフェクション ,  真核細胞 ,  蛍光顕微鏡 ,  *肺胞 ,  酸素欠乏 ,  PCR法 ,  アクチン
準シソーラス用語： 肺胞上皮細胞 ,  発現ベクター ,  *細胞株 ,  *LC3 , 【Automatic Indexing@JST】

著者キーワード (5件)： Alveolar epithelial cell ,  Autophagy ,  Gene transfection ,  Stable expression ,  Oxygen deficit

分類 (2件)： 遺伝学研究法  (EC01020N) ,  分子遺伝学一般  (EC02010J)

タイトルに関連する用語 (5件)： LC3 ,  遺伝子 ,  肺胞 ,  細胞株 ,  発現