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J-GLOBAL ID：201602268030167864   整理番号：16A1016977

KOKSAGHYZファルネシル基ピロリン酸シンターゼ遺伝子のクローニングと機能解析【JST・京大機械翻訳】

Molecular Cloning and Functional Analysis of Farnesyl Pyrophosphate Synthase Genes from Taraxacum kok-saghyz Rodin

著者 (6件)： Cao Xinwen (College of Life Science, Shihezi University) ,  Wang Xiuzhen (College of Life Science, Shihezi University) ,  Li Yongmei (College of Life Science, Shihezi University) ,  Zhao Lijing (College of Life Science, Shihezi University) ,  Ma Haixia (College of Life Science, Shihezi University) ,  Yan Jie (College of Life Science, Shihezi University)
資料名： Zhongguo Nongye Kexue  (Zhongguo Nongye Kexue)
巻： 49  号： 6  ページ： 1034-1046  発行年： 2016年 
JST資料番号： W1459A  ISSN： 0578-1752  CODEN： CKNYAR  資料種別： 逐次刊行物 (A)
記事区分： 原著論文  発行国： 中国 (CHN)  言語： 中国語 (ZH)

抄録/ポイント： 【目的】ファルネシル基ピロリン酸シンターゼ(FARNESYL DIPHOSPHATE SYNTHASE,FPS)は天然ゴムの生合成のメバロン酸経路における鍵酵素であり,そして,野生KOKSAGHYZ変換KOKSAGHYZFPS遺伝子を得たKOKSAGHYZゴム生合成過程においてFPS遺伝子の調節作用を研究するために基礎を築いた。【方法】相同クローニングの方法を採用してKOKSAGHYZFPS遺伝子の全長CDNA配列を得た,そしてこの遺伝子のバイオインフォマティクス解析を行った。KOKSAGHYZと他の18種の異なる高等植物のFPSのアミノ酸配列に対する多重配列と照合の進化樹分析を行った。異なるKOKSAGHYZ:組織を抽出した。、葉柄、葉、茎、根及び花と種子RNAはFPS遺伝子,組織特異的発現分析を行い,そして異なる成長時期のKOKSAGHYZのFPS発現量に対して比較を行った,KOKSAGHYZ成長過程におけるFPSの調節作用を解析した。この遺伝子の野生型KOKSAGHYZにおいて過剰発現し,得られたトランスジェニックと野生型植物FPSの相対的発現レベルに対して分析を行い,トランスジェニックと野生型植物のゴム含量の変化を比較した。アルカリ煮法抽出とトランスジェニック野生型KOKSAGHYZ根のゴム,ゴムの含有量を測定した。【結果】獲得KOKSAGHYZFPS遺伝子の全長CDNA配列は,(GENBANK登録番号558350.1)KJTKFPSと命名した。配列分析は,この遺伝子は1つの1 029 BPのオープンリーディングフレームを含む342個のアミノ酸をコードし,コードする蛋白質の相対分子量は39.35 KDであり,理論的等電点(PI)は5.41であり,平均疎水性は-0.242であることを示した。多重配列アラインメントの結果は表明,FPSKOKSAGHYZアミノ酸配列は高等植物FPS遺伝子の5つの保存ドメインを含み,系統発生分析の結果は,新疆野生KOKSAGHYZとタンポポを同じ分岐にあり,その類縁関係を最近示した。,TKFPS蛋白質は膜貫通領域がなかったが,細胞質の中に位置づける,TMHMMとTARGETP亜細胞位置決め分析でわかった可能性機能を発揮する。特異的組織分析の結果TKFPSKOKSAGHYZの根、葉柄、葉、小花梗、花、種子においてすべて発現があり,その中には,葉では発現量が最も高く,根,花において発現量は最も低い。組換えPCAMBIA2300-35S-TKFPS経農菌媒介野生KOKSAGHYZリーフディスク変換,6株のトランスジェニック植物を得た。リアルタイム蛍光定量的PCR検出では野生型と比べ,トランスジェニックFPSの相対発現量レベルが有意に上昇し,6株のトランスジェニック株TKFPS発現量の平均は野生型の約2.8倍であると分かった。ゴムの含有量測定結果は,野生型より6株のトランスジェニック系統の根におけるゴムの質量分率が平均3.92%増加することを示した。【結論】成功KOKSAGHYZからTKFPSを得るクローンされ,野生KOKSAGHYZTKFPSの高収率株KOKSAGHYZトランスフェクションを得る変換,FPSはKOKSAGHYZラテックス過程において重要な機能を果たす。Data from the ScienceChina, LCAS.【JST・京大機械翻訳】

シソーラス用語： *機能分析 ,  *合成酵素 ,  分子量 ,  *遺伝子 ,  トランスジェニック植物 ,  野生型 ,  蛍光 ,  アミノ酸 ,  クローン ,  疎水性 ,  アミノ酸配列
準シソーラス用語： オープンリーディングフレーム ,  過剰発現 ,  バイオインフォマティクス ,  *クローニング , 【Automatic Indexing@JST】

著者キーワード (4件)： Taraxacum kok-saghyz Rodin ,  farnesyl pyrophosphate synthase ,  bioinformatics ,  real-time PCR

分類 (2件)： 代謝と栄養  (EG03054K) ,  酵素一般  (EB09010D)

タイトルに関連する用語 (5件)： ピロリン酸 ,  シンターゼ ,  遺伝子 ,  クローニング ,  機能解析