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J-GLOBAL ID:201702220034885692   整理番号:17A0537283

類のΒ-インターフェロンの発現精製と抗ウイルス活性および体外半減期の研究【JST・京大機械翻訳】

Purification, antiviral activity and in vitro half-life of elastin-like polypeptide-fused canine interferon-β
著者 (4件):
資料名:
巻: 46  号: 12  ページ: 1543-1549  発行年: 2016年 
JST資料番号: C3087A  ISSN: 1673-4696  資料種別: 逐次刊行物 (A)
記事区分: 原著論文  発行国: 中国 (CHN)  言語: 中国語 (ZH)
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長效犬Β-インターフェロン(CAIFNB)遺伝子工学製品を開発するために,ポリメラーゼ連鎖反応(PCR)を用いて,犬基 群のゲノムDNAを増幅し,組換えベクターを大腸菌BLR(DE3)に変換したIPTG-ELPの発現はIPTGによって誘発され,ELPによって誘発された温度感受性感受性(ITC)によって精製され,50%の細胞障害抑制試験によってインターフェロン活性を検出し,50%のヒスチジンヒスチジンタグを融合したHIS-CAIFNBと比較した。結果により、≦283°Cの条件下で、90% CAIFNB-ELPは可溶性発現であり、HIS-CAIFNBは不溶性封入体で発現することが分かった。最適条件下で,1回のITCによって得られたCAIFNB-ELPの純度は96%であり,それは封入体1のHIS-CAIFNBの純度(85%)より有意に高かった。CAIFNB-ELPの抗ウイルス活性は1×105U/MGであり,HIS-CAIFNBの抗ウイルス活性よりも10倍高かった。CAIFNB-ELPのIN VITRO半減期は>243Hであり,HIS-CAIFNBのIN VITRO半減期(123H)より有意に長かった。結果は,CAIFNB-ELPが,高発現レベル,簡単な精製,およびIN VITROでの長い半減期の利点を持ち,長期間のインターフェロンの開発と利用に有望であることを示した。Data from the ScienceChina, LCAS. Translated by JST【JST・京大機械翻訳】
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遺伝学研究法  ,  分析機器  ,  酵素一般  ,  遺伝子操作 

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