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J-GLOBAL ID:201702229051252567   整理番号:17A0161564

ブタCD163 CDNAの増幅とその安定発現細胞系(CHO-K1)の確立【JST・京大機械翻訳】

Amplification of porcine CD163 cDNA and establishment of CHO-K1 cell line stably expressing CD163
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資料名:
巻: 39  号:ページ: 88-92,122  発行年: 2016年 
JST資料番号: C2020A  ISSN: 1000-1573  CODEN: HNDBEM  資料種別: 逐次刊行物 (A)
記事区分: 原著論文  発行国: 中国 (CHN)  言語: 中国語 (ZH)
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ブタCD163はブタ繁殖と呼吸症候群ウイルス(PRRSV)の重要な受容体の一つである。この受容体のウイルス感染過程におけるPRRSVとの相互作用を検討するために、ブタ全長CD163遺伝子を安定的に発現する細胞系を確立する必要がある。まず,RT-PCR法によりブタ肺胞マクロファージから全長CD163CDNAを増幅し,次いでKPNI IとXHOI IによりPCDNA3.1Aプラスミドに挿入し,真核発現ベクターを構築した。発現ベクターをCHO-K1細胞にトランスフェクトし,G418により加圧し,細胞膜上にブタCD163を安定的に発現する細胞系をスクリーニングした。その結果,増幅されたブタのCD163遺伝子は遺伝子バンクの配列と一致し,個別の塩基の突然変異はコードアミノ酸の変化を引き起こさないことが示された。発現ベクターとG418のスクリーニングにより,ブタの全長CD163遺伝子を安定的に発現するCHO-K1細胞系を構築した。フローサイトメトリー分析により,組換えブタCD163がCHO-K1細胞膜で発現することが確認され,これはPRRSVとCD163受容体の相互作用の更なる研究のための必要条件を提供した。Data from the ScienceChina, LCAS. Translated by JST【JST・京大機械翻訳】
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ウイルス感染の生理と病原性 

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