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J-GLOBAL ID:201702233571388048   整理番号:17A0158430

マウスのFLT3リガンドの原核発現及び異なるサブタイプの樹状細胞の調製における応用【JST・京大機械翻訳】

Expression of murine Flt3 ligand and its application in the in vitro preparation of different dendritic cell subsets
著者 (8件):
資料名:
巻: 36  号:ページ: 641-646  発行年: 2016年 
JST資料番号: C2322A  ISSN: 0254-5101  CODEN: ZWMZDP  資料種別: 逐次刊行物 (A)
記事区分: 原著論文  発行国: 中国 (CHN)  言語: 中国語 (ZH)
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目的:マウスのFLT3リガンドを発現させ、異なる亜型DCSの体外誘導における応用潜在力を分析し、異なる亜型DCSの更なる研究に実験データを提供する。【方法】FLT3L遺伝子をPCRによって増幅し,PCOLD-FLT3Lプラスミドを構築し,大腸菌BL21(DE3)に形質転換し,精製した。組換えタンパク質をSDS-PAGEとWESTERN BLOT分析により、マウス骨髄由来DCSの誘導調製に用い、フローサイトメトリーにより異なるDC亜型関連分子マーカー及びCD40、CD80、CD86とMHCIIの発現を分析した。IL-12とIFN-Αの発現は,ELISAによって測定した。結果:SDS-PAGEの結果により、目的タンパク質の発現は成功し、精製後の純度は93.3%に達し、WESTERN BLOTの結果により、良好な免疫反応性があることが明らかになった。同時に、このタンパクはマウス骨髄細胞を比較的に高い比率(約60%)のDCSに分化し、しかもCDCS(CD11C~+CD45RA~-)とPDCS(CD11C~+CD45RA~+)亜型を含む。LPS刺激後2種類のDC亜型はCD40、CD80、CD86とMHCIIの発現をアップレギュレーションし、しかも高レベルのIL-12とIFN-Αを分泌した。結論:本研究では、組換えマウスFLT3リガンドタンパク質の獲得に成功し、良好な生物学的機能を有するCDCSとPDCS亜型を作製することができ、今後の研究に基礎材料を提供することができる。Data from the ScienceChina, LCAS. Translated by JST【JST・京大機械翻訳】
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免疫反応一般 

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