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J-GLOBAL ID:201702233765385353   整理番号:17A0067283

AMPELOCALAMUS2遺伝子のクローニングとその植物発現ベクターの構築【JST・京大機械翻訳】

Cloning and construction of plant expression vector of NeMT2 gene in Nanophyton erinaceum
著者 (4件):
資料名:
巻: 36  号:ページ: 897-905  発行年: 2016年 
JST資料番号: C2429A  ISSN: 1000-3142  CODEN: GUZHEI  資料種別: 逐次刊行物 (A)
記事区分: 原著論文  発行国: 中国 (CHN)  言語: 中国語 (ZH)
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本研究では、RACE(RAPID AMPLIFICATION OF CDNA ENDS)技術を用いて、AMPELOCALAMUSからに(METAL-LOTHIONEIN,MT)のCDNA配列を分離し、NEMT2と命名した。GENBANKに登録番号はKT835290である。この遺伝子の全長は590BPであり、オープンリーディングフレームは237BPであり、78個のアミノ酸をコードし、コードされたアミノ酸配列には14個のシステイン残基(CYS、C)があり、ペプチド鎖のN末端とC末端に分布している。遺伝子コード化蛋白質の分子量は7.603KDであり,等電点は4.71であった。系統発生分析により,AMPELOCALAMUS2とアカザの (AEF01492)とCASPICA(AH162953)の相同性が最も高く,次がサトウダイコン(XP_010667708.1)であることを示した。生物情報学分析により、メタロチオネインタンパク質NEMT2はシグナルペプチド構造を持たず、貫通の親水性タンパク質に属することが分かった。疎水性分析により、NEMT2タンパクの35~45個のアミノ酸の間に強い疎水性があり、その中の第4位のASPは最も強い疎水性(1.444)を持つことが分かった。構造予測はこの蛋白質二次構造の主要な要素がランダムコイルであることを予測した。RT-PCRによるNEMT2遺伝子の発現分析によると、NEM72遺伝子は銅鉱区と非銅区のAMPELOCALAMUSの葉身においていずれも発現しているが、この遺伝子の銅鉱区のAMPELOCALAMUS葉身の発現量は非銅区より明らかに高い。AMPELOCALAMUS2遺伝子を植物発現ベクターPCAMBIA1300の35Sプロモーター下流にクローニングし,この遺伝子の植物過剰発現ベクターPCAMBIA1300+NEMT2を構築した。本研究の結果は,この遺伝子の機能と重金属ストレスの分子機構の更なる研究のための基礎を提供した。Data from the ScienceChina, LCAS. Translated by JST【JST・京大機械翻訳】
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分類 (2件):
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遺伝子の構造と化学  ,  酵素一般 
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