Sinorhizobium melilotiにおけるクローニング自由ゲノム工学はCre/loxP部位特異的組換えの応用を進歩させる【Powered by NICT】

Dohlemann Johannes; Brennecke Meike; Becker Anke

文献

J-GLOBAL ID：201702248665223675 整理番号：17A0318230

Sinorhizobium melilotiにおけるクローニング自由ゲノム工学はCre/loxP部位特異的組換えの応用を進歩させる【Powered by NICT】

Cloning-free genome engineering in Sinorhizobium meliloti advances applications of Cre/loxP site-specific recombination

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資料名：
巻： 233 ページ： 160-170 発行年： 2016年
JST資料番号： A0456C ISSN： 0168-1656 資料種別：逐次刊行物 (A)
記事区分：原著論文発行国：オランダ (NLD) 言語：英語 (EN)

土壌α-プロテオバクテリアSinorhizobium melilotiは共生的窒素固定の研究のためのモデルとして使用でき,持続可能な農業における非常に重要なプロセス。ここでは,S.melilotiのゲノム編集を促進する遺伝的ツールボックスの進歩を報告した。hsdMSRオペロンはI型制限-修飾(R M)系をコードする。S.melilotiの形質転換は適切なメチル化パターンを欠く制限エンドヌクレアーゼH sdR分解DNAにより相殺される。大腸菌由来プラスミドDNAを用いた形質転換増強を示す安定なS.melilotiのhsdR欠失変異体を提供し,E.coliプラスミドドナー,S.melilotiメチルトランスフェラーゼ遺伝子を発現する,を用いて,S.melilotiの形質転換効率の増加の代替戦略であることを示した。さらに,S.meliloti,Agrobacterium tumefaciensとXanthomonas campestrisのための新しいクローニングフリーゲノム編集(CFGE)法を考案し,S.melilotiにおけるCre/lox組換え系の複雑な応用のためのこの方法の適用性を実証した。大ゲノム領域の連続的欠失を可能にし,強化されたCre/lox系を確立した。loxスペーサ変異体の分析は,特異的組換を仲介するlox部位のセットを同定した。いくつかの非無差別Cre認識部位の可給性は,同時特異的Cre/lox組換え事象を可能にした。Cre/lox組換えと組み合わせたCFGEは標的ゲノム編集のための強力なアプローチとして提案し,シャシとしてS.melilotiの遺伝的接近性を促進するために操作の連続段階を含んでいる。Copyright 2017 Elsevier B.V., Amsterdam. All rights reserved. Translated from English into Japanese by JST.【Powered by NICT】

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微生物の生化学

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