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J-GLOBAL ID:201702253495237619   整理番号:17A0300700

イチゴ8遺伝子のCDNAクローニング,バイオインフォマティクス解析および原核発現条件の最適化を行った。【JST・京大機械翻訳】

Cloning, Bioinformatic Analysis of Strawberry FaUVR8 Gene and Optimization of Its Prokaryotic Expression Conditions
著者 (6件):
資料名:
巻: 14  号: 11  ページ: 2964-2975  発行年: 2016年 
JST資料番号: C2681A  ISSN: 1672-416X  資料種別: 逐次刊行物 (A)
記事区分: 原著論文  発行国: 中国 (CHN)  言語: 中国語 (ZH)
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紫外線B(UV-B)は植物の生長発育に対して重要な調節作用があり、その中のUV RESISTANCE LOCUS 8タンパクはUV-Bの光受容体として植物のUV-B過程において重要な役割を果たす。イチゴは重要な経済果樹であり、現在、イチゴのUV-B光受容体に関する報告は少ない。イチゴのUV-B受容体蛋白質を研究するために,本研究では,相同性クローニング法を用いて,`-イチゴにおけるUV-B光受容体のCDNA配列を得て,バイオインフォマティクス解析を行い,原核生物発現ベクターPET32A-UVR8を構築した。組換蛋白質の誘導条件(誘導温度,IPTG濃度,菌液濃度及び誘導時間)を中心点応答曲面法を用いて最適化した。結果は以下を示す。クローン8の完全長CDNA配列をクローン化し,FAUVR8と命名し,分子量は47.28KDであり,予測分子量は47.28KD,等電点PIは5.85であった。再構成蛋白質の三次元構造は,この蛋白質が7つのΒ-シート構造を含むことを示した。融合蛋白質は原核生物発現により得られ,4つの誘導条件の最適化により,OD_(600)=0.7に達し,0.55MMOL/LのIPTGを添加し,27.72°Cで9時間誘導した。組換え蛋白質の最大濃度は79ΜG/MLであった。本研究の結果は,後期8蛋白質と相互作用する下流蛋白質を発見し,更なる機能研究のための参照を提供した。Data from the ScienceChina, LCAS. Translated by JST【JST・京大機械翻訳】
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植物生理学一般  ,  遺伝子発現 

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