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J-GLOBAL ID：201702254782691146   整理番号：17A0103497

抗ヒトP53単鎖抗体を酵母ツーハイブリッド法によりスクリーニングした。【JST・京大機械翻訳】

Screening of special scFv antibody against human p53 protein by yeast two-hybrid system

著者 (7件)： Zheng Meiyun (College of Biological Science and Engineering,Fuzhou University) ,  Li Miaojun (College of Biological Science and Engineering,Fuzhou University) ,  Shen Guoying (College of Biological Science and Engineering,Fuzhou University) ,  Lin Suying (College of Biological Science and Engineering,Fuzhou University) ,  Li Huibo (College of Biological Science and Engineering,Fuzhou University) ,  Meng Chun (College of Biological Science and Engineering,Fuzhou University) ,  Wang Hang (College of Biological Science and Engineering,Fuzhou University)
資料名： Xibao yu Fenzi Mianyixue Zazhi  (Xibao yu Fenzi Mianyixue Zazhi)
巻： 32  号： 1  ページ： 112-117  発行年： 2016年 
JST資料番号： C2523A  ISSN： 1007-8738  CODEN： XFMZFM  資料種別： 逐次刊行物 (A)
記事区分： 原著論文  発行国： 中国 (CHN)  言語： 中国語 (ZH)

抄録/ポイント： 目的:重複PCR技術を用い、マウス抗ヒトP53遺伝子の全一本鎖抗体(SCFV)ライブラリーを構築し、酵母ダブルハイブリッドシステムを利用して抗ヒトP53 SCFVをスクリーニングする。【方法】P53デコイベクターPGBKT7-P53を構築し,P53蛋白質を免疫化したマウス脾臓組織から全RNAを抽出し,逆転写ポリメラーゼ連鎖反応(RT-PCR)とオーバーラップPCRを用いてV_H-リンカー-V_LSCFV遺伝子ライブラリーを構築した。これをベクターベクター7に連結し,生成物を餌ベクターを含むAH109酵母に変換し,栄養欠損性平板で陽性クローンをスクリーニングした。免疫細胞化学的染色を用いて,SCFVとヒトP53蛋白質の親和性を確認した。【結果】プラスミドPGBKT7-P53を首尾よく構築し,酵母AH109細胞に形質転換し,それは酵母細胞における自己活性化を誘発し,宿主細胞に対する毒性を持たなかった。V_H-リンカー-V_L型の抗体ライブラリーを獲得し、捕獲ベクターを構築し、酵母ダブルハイブリッドシステムを利用して、ヒトP53 SCFVフラグメントをスクリーニングすることに成功した。SCFV1,SCFV2とSCFV3はヒトP53蛋白質との親和性があり,細胞,組織中のP53蛋白質の検出に用いることができる。結論:酵母2ハイブリッドシステムを利用して、良好な親和性のあるP53 SCFVを獲得し、SCFVを選別するために新しい構想を提供する。Data from the ScienceChina, LCAS. Translated by JST【JST・京大機械翻訳】

シソーラス用語： RT-PCR法 ,  PCR法 ,  形質転換 ,  ベクター ,  *ヒト ,  脾臓 ,  親和性 ,  遺伝子ライブラリー ,  *酵母 ,  クローン ,  プラスミド ,  抗体ライブラリー ,  リンカ ,  *酵母ツーハイブリッド法 ,  *一本鎖抗体 ,  *微生物

著者キーワード (4件)： p53 protein ,  single-chain fragment variable (scFv) antibody ,  antibody library ,  yeast two-hybrid system

分類 (1件)： 核酸一般  (EB04010U)

タイトルに関連する用語 (5件)： ヒト ,  p53 ,  単鎖抗体 ,  酵母ツーハイブリッド法 ,  スクリーニング