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J-GLOBAL ID：201702278592817185   整理番号：17A0103503

組換えヒト平足蛋白質遺伝子は,チャイニーズハムスター卵巣細胞において安定して発現した。【JST・京大機械翻訳】

Stable expression of recombinant human podoplanin in Chinese hamster ovary(CHO) cells

著者 (7件)： Qu Le (Jiangsu Institute of Hematology,Ministry of Health Key Laboratory of Thrombosis and Haemostasis,First Affiliated Hospital,Soochow University) ,  Zhao Xingpeng (Jiangsu Institute of Hematology,Ministry of Health Key Laboratory of Thrombosis and Haemostasis,First Affiliated Hospital,Soochow University) ,  Fu Jianxin (Jiangsu Institute of Hematology,Ministry of Health Key Laboratory of Thrombosis and Haemostasis,First Affiliated Hospital,Soochow University) ,  Xia Lijun (Jiangsu Institute of Hematology,Ministry of Health Key Laboratory of Thrombosis and Haemostasis,First Affiliated Hospital,Soochow University) ,  Dai Lan (Jiangsu Institute of Hematology,Ministry of Health Key Laboratory of Thrombosis and Haemostasis,First Affiliated Hospital,Soochow University) ,  Ruan Changgeng (Jiangsu Institute of Hematology,Ministry of Health Key Laboratory of Thrombosis and Haemostasis,First Affiliated Hospital,Soochow University) ,  Zhao Yiming (Jiangsu Institute of Hematology,Ministry of Health Key Laboratory of Thrombosis and Haemostasis,First Affiliated Hospital,Soochow University)
資料名： Xibao yu Fenzi Mianyixue Zazhi  (Xibao yu Fenzi Mianyixue Zazhi)
巻： 32  号： 1  ページ： 25-28,33  発行年： 2016年 
JST資料番号： C2523A  ISSN： 1007-8738  CODEN： XFMZFM  資料種別： 逐次刊行物 (A)
記事区分： 原著論文  発行国： 中国 (CHN)  言語： 中国語 (ZH)

抄録/ポイント： 【目的】真核生物発現プラスミドプラスミド-PEGFP-N1を構築し,組換えヒトPDPN(CHO)細胞を安定的に発現させることによって,CHO細胞の生物学的活性を研究する。方法:逆転写PCRとDNA組換え技術を用いて、HEK293細胞からPDPN CDNAをクローニングし、強化緑色蛍光タンパク質(EGFP)標識を持つ真核発現ベクターPEGFP-N1に挿入した。組換えベクターを,PCR,酵素消化および配列決定によって同定した。組換えベクターをCHO細胞に形質移入し,EGFP発現を蛍光顕微鏡により検出し,CHO細胞におけるPDPNの発現をウェスタンブロット法により検出し,PDPNのCHO細胞をフローサイトメトリーにより検出した。血小板凝集実験を用いて,分離した細胞株の生物学的活性を検出した。結果:DNA配列決定と制限酵素消化により,PDPN遺伝子がPEGFP-N1ベクターに正しくクローンされ,組換えベクターがCHO細胞に安定にトランスフェクションされた後,蛍光顕微鏡下で緑色蛍光が観察され,フローサイトメトリーにより細胞の高発現が観察された。ウエスタンブロットの結果は,CHO細胞の表面にPDPN蛋白質が発現したことを示した。PDPNを過剰発現したCHO細胞はヒト血小板凝集を誘導した。結論:PDPNタンパク質を安定的に発現するCHO細胞株の構築に成功し、この細胞株はPDPNを発現し、血小板凝集を誘導することができる。Data from the ScienceChina, LCAS. Translated by JST【JST・京大機械翻訳】

シソーラス用語： ウェスタンブロット法 ,  緑色蛍光タンパク質 ,  *CHO細胞 ,  酵素的分解 ,  DNA組換 ,  *ヒト ,  蛍光 ,  フローサイトメトリー ,  トランスフェクション ,  血小板凝集 ,  生物活性 ,  蛍光顕微鏡 ,  ベクター ,  RT-PCR法
準シソーラス用語： EGFP , 【Automatic Indexing@JST】

著者キーワード (5件)： podoplanin ,  eukaryotic expression ,  pEGFP-N1 ,  CHO cells ,  platelet aggregation

分類 (3件)： 遺伝子操作  (EC02050B) ,  遺伝子発現  (EC02040Q) ,  細胞・組織培養法  (EA03040R)

タイトルに関連する用語 (6件)： 組換え ,  ヒト ,  蛋白質 ,  遺伝子 ,  チャイニーズハムスター卵巣細胞 ,  発現