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J-GLOBAL ID：201702281226368474   整理番号：17A0674075

STREPTOMYCES HYGROSCOPICUSにおけるグルタミン遺伝子の同定および大腸菌における発現【JST・京大機械翻訳】

Identification of the gene encoding transglutaminase zymogen from Streptomyces hygroscopicus and its expression in Escherichia coli

著者 (7件)： Zengliang Ren (State Key Laboratory of Food Science and Technology) ,  Dongxu Zhang (State Key Laboratory of Food Science and Technology) ,  Meiying Yu (School of Biotechnology) ,  Qingxin Zhao (State Key Laboratory of Food Science and Technology) ,  Guocheng Ou (State Key Laboratory of Food Science and Technology) ,  Jian Chen (State Key Laboratory of Food Science and Technology) ,  Jing WU (State Key Laboratory of Food Science and Technology)
資料名： Weishengwu Xuebao  (Weishengwu Xuebao)
巻： 48  号： 4  ページ： 480-485  発行年： 2008年 
JST資料番号： C2382A  ISSN： 0001-6209  資料種別： 逐次刊行物 (A)
記事区分： 原著論文  発行国： 中国 (CHN)  言語： 中国語 (ZH)

抄録/ポイント： [目的]本研究の目的は,STREPTOMYCES カビ由来のトランスグルタミナーゼ遺伝子を同定することであった。大腸菌のクローンと発現を研究した。この酵素とその相同酵素の活性中心アミノ酸配列を分析した。【方法】グルタミン PRO(PRO M203062)の発酵液から,グルタミン(PRO-MTGASE)を分離し,精製した。N末端の10アミノ酸配列を検出し,他のSTREPTOMYCES 源由来の遺伝子配列と比較して,PRO-MTGASE遺伝子を増幅し,発現ベクターPET-20B(+)シグナルペプチドの下流に挿入した。分泌型発現ベクターベクター-MTGを構築し,異なる大腸菌宿主BL21(DE3)とROSETTA(DE3)PLYSSに変換した。[結果]PRO-MTGASEの完全遺伝子配列を得て,多重塩基配列アラインメントにより,S.PLATENSISととのPRO-MTGASE遺伝子との相同性が92%であることを示した。ROSETTA(DE3)PLYSSを用いて24°Cに冷却することにより,部分的細胞外発現のプロを得た。SDS-PAGEは,組換蛋白質の分子量が約44KDAであり,STREPTOMYCES発現の天然酵素と一致していることを示した。4時間の発酵後に,発酵液中の組換えMei原経Yiの活性は0.24U/MLに達した。[結論]本研究は,STREPTOMYCES ののトランスグルタミナーゼ遺伝子の最初の報告であり,また,中国において初めて大腸菌を利用してPRO-MTGASEの細胞外可溶性発現を実現した。Data from the ScienceChina, LCAS. Translated by JST【JST・京大機械翻訳】

シソーラス用語： 分子量 ,  アミノ酸配列 ,  酵素活性度 ,  相同性 ,  トランスグルタミナーゼ ,  発酵 ,  ベクター ,  SDS-PAGE ,  シグナルペプチド ,  発酵液 ,  *遺伝子 ,  組換タンパク質 ,  *大腸菌 ,  発現ベクター ,  遺伝子配列 ,  *微生物 ,  アミノ酸 ,  脂肪族アミン ,  脂肪族カルボン酸 ,  カルボアミド ,  ジカルボン酸 ,  第一アミン

著者キーワード (5件)： Streptomyces hygroscopicus ,  microbial transglutaminase ,  E. coli ,  cloning ,  expression

分類 (2件)： 酵素一般  (EB09010D) ,  遺伝子発現  (EC02040Q)

物質索引 (1件)： グルタミン

タイトルに関連する用語 (5件)： Streptomyces ,  グルタミン ,  遺伝子 ,  同定 ,  大腸菌