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J-GLOBAL ID:201702285751888183   整理番号:17A0344874

毒チフス菌の分泌発現システムの構築とその特性【JST・京大機械翻訳】

Construction and characterization of type III secretion system of attenuated Salmonella typhimurium
著者 (9件):
資料名:
巻: 32  号: 12  ページ: 1664-1675  発行年: 2016年 
JST資料番号: C2184A  ISSN: 1000-3061  CODEN: SGXUED  資料種別: 逐次刊行物 (A)
記事区分: 原著論文  発行国: 中国 (CHN)  言語: 中国語 (ZH)
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本研究では,組換え弱毒化SALMONELLA TYPHIMURIUM(経口)ワクチンを開発するために,PYA 3493(プラスミド100)遺伝子とそのプロモーターを,の3493プラスミドに基づいて,のプロモーターを置換するために使用した。サルモネラ-SOPE_(NT100)の発現ベクターを構築した。次に,プラスミドPYA-SOPE_(NT100)を,サルモネラ菌ΔΔΔΔに形質転換し,そして,毒-SOPE_(NT100)の3つの分泌型発現系を構築した。それらの生物学的特性を研究し,報告遺伝子の下流に報告遺伝子をクローニングし,組換え株ΔCRPΔASDSL1344(PYA-SOPE_(NT100)-EGFP)を構築し,VERO細胞に感染させた。WESTERN BLOTTINGを用いて、このシステムの逓呈外源抗原の能力を分析した。PCR,制限酵素消化,および配列決定の結果は,毒 SOPE ΔCRP(1344-SOPE_(NT100))の3型分泌発現システムの構築に成功したことを示した。生物学的特性の同定結果によると、その血清型は親株ΔΔ SL1344及び野生株SL1344と一致している。それらの生化学的特性は,株のそれらと類似していたが,野生株と比較して,明らかに変化した。成長速度もより遅い。組換え株ΔΔΔASDSLASDSL((-SOPE_(NT100))のLD_(50)は野生株SL1344より7.0×104倍低かった。WESTERN BLOTTINGの結果により、組換え菌の培養上清中にSOPE_(NT100)-EGFP融合タンパク(37KDA)を検出できることが分かった。組換え株をVERO細胞に感染させると,SOPE_(NT100)-EGFP融合蛋白質(37KDA)とEGFP蛋白質(27KDA)が同時に検出された。以上の結果により、本研究は新型のチフス菌のΔCRPΔASD((-SOPE_(NT100))の三型分泌発現システムを構築し、それは有効な抗原を効果的に獲得できることを証明した。この組換え菌株は潜在的に安全、安定、効率的に外来遺伝子を発現する経口組換え型生分解性ベクターとして利用できる。Data from the ScienceChina, LCAS. Translated by JST【JST・京大機械翻訳】
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分類 (2件):
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遺伝子発現  ,  遺伝子の構造と化学 
タイトルに関連する用語 (5件):
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