文献

J-GLOBAL ID：201702285876714026   整理番号：17A0675491

E.COLIにおける炭疽毒素PAの発現,精製およびその生物活性分析を行った。【JST・京大機械翻訳】

Expression of anthrax protective antigen in E.coli and purification and analysis of biological activity of expression products

著者 (9件)： LI YuXia (Beijing Institute of Biotechnology) ,  LI WeiDong (Beijing Institute of Biotechnology) ,  LING Yan (Beijing Institute of Biotechnology) ,  HU Wei (Beijing Institute of Biotechnology) ,  MAO YunYun (Department of Life Science; Anhui University) ,  ZHOU Wei (Beijing Institute of Biotechnology) ,  ZHANG JingSheng (Beijing Institute of Biotechnology) ,  LIANG Long (Beijing Institute of Biotechnology) ,  CHEN HuiPeng (Beijing Institute of Biotechnology)
資料名： Junshi Yixue Kexueyuan Yuankan  (Junshi Yixue Kexueyuan Yuankan)
巻： 32  号： 2  ページ： 116-120  発行年： 2008年 
JST資料番号： C2452A  ISSN： 1000-5501  CODEN： JYKYEL  資料種別： 逐次刊行物 (A)
記事区分： 原著論文  発行国： 中国 (CHN)  言語： 中国語 (ZH)

抄録/ポイント： 目的;PET-32A(+)-PA組換えプラスミドを構築し、大腸菌(ESCHERICHIA COLI)BL21(DE3)に融合蛋白TRX-PAの発現を実現し、生物学的活性を有するPAを獲得した。方法;PCR法によりPAのコード配列を増幅し,PET-32A(+)ベクターのTRXコード領域と融合し,PET-32A(+)-PA組換えプラスミドを生成し,組換えプラスミドをE.COLI BL21(DE3)に変換した。PET-32A(+)-PAをIPTGによって誘発し,SDS-PAGEとウェスタンブロット法によって分析した。NI(2+)アフィニティークロマトグラフィーを用いて,発現産物を精製し,勾配透析により精製した。TRX-PAの生物学的活性を,プロテアーゼ分解と細胞毒性試験によって分析した。【結果】;組換えプラスミドPET-32A(+)-PAを首尾よく構築し,SDS-PAGEにより精製し,SDS-PAGE分析により,融合蛋白質の相対分子量が正しいことを示した。蛋白質純度は76%のTRX-PAがIN VITRO及びIN VITROでジメフリン(フリン)に分解され,TRX-PAの正確な分解は致死因子(LETHAL FACTOR,LF)がマウスRAW264.7細胞内に入り,細胞毒性の基礎を産生する。結論;組換えTRX-PA融合蛋白質はE.COLI BL21(DE3)において効果的に発現し,生物学的活性を示した。Data from the ScienceChina, LCAS. Translated by JST【JST・京大機械翻訳】

シソーラス用語： 透析 ,  大腸菌 ,  SDS-PAGE ,  RAW264.7細胞 ,  ペプチド結合ヒドロラーゼ ,  融合タンパク質 ,  ウェスタンブロット法 ,  *生物活性 ,  細胞毒性 ,  PCR法 ,  アフィニティークロマトグラフィー ,  プラスミド ,  分子量 ,  ベクター ,  フリン ,  微生物 ,  バイオアッセイ ,  化学分析 ,  解析 ,  分析 ,  生化学的分析

著者キーワード (5件)： anthrax toxin ,  protective antigen ,  fusion expression ,  purification ,  furin

分類 (3件)： 酵素一般  (EB09010D) ,  遺伝子操作  (EC02050B) ,  微生物,組織・細胞培養による物質生産一般  (FK03010P)

タイトルに関連する用語 (5件)： 炭疽毒素 ,  Pa ,  精製 ,  生物活性 ,  分析