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J-GLOBAL ID：201702286479065747   整理番号：17A0109869

金属-LAMP可視化検出システムにおける金属錯化剤酸性Kの応用【JST・京大機械翻訳】

Application of Metal Indictor Acid Chrome Blue K in TNOS- LAMP Visual Detection System

著者 (8件)： Wang Xiaofu (State Key Laboratory Breeding Base for Zhejiang Sustainable Pest and Disease Control,Zhejiang Academy of Agricultural Sciences) ,  Fu Zhenfang (State Key Laboratory Breeding Base for Zhejiang Sustainable Pest and Disease Control,Zhejiang Academy of Agricultural Sciences) ,  Li Yueying (College of Chemistry and Life Science,Shenyang Normal University) ,  Chen Xiaoyun (State Key Laboratory Breeding Base for Zhejiang Sustainable Pest and Disease Control,Zhejiang Academy of Agricultural Sciences) ,  Peng Cheng (State Key Laboratory Breeding Base for Zhejiang Sustainable Pest and Disease Control,Zhejiang Academy of Agricultural Sciences) ,  Xu Xiaoli (State Key Laboratory Breeding Base for Zhejiang Sustainable Pest and Disease Control,Zhejiang Academy of Agricultural Sciences) ,  Wei Wei (State Key Laboratory Breeding Base for Zhejiang Sustainable Pest and Disease Control,Zhejiang Academy of Agricultural Sciences) ,  Xu Junfeng (State Key Laboratory Breeding Base for Zhejiang Sustainable Pest and Disease Control,Zhejiang Academy of Agricultural Sciences)
資料名： Nongye Shengwu Jishu Xuebao  (Nongye Shengwu Jishu Xuebao)
巻： 24  号： 9  ページ： 1374-1383  発行年： 2016年 
JST資料番号： C2715A  ISSN： 1674-7968  資料種別： 逐次刊行物 (A)
記事区分： 原著論文  発行国： 中国 (CHN)  言語： 中国語 (ZH)

抄録/ポイント： ループ媒介等温増幅法(LOOP-MEDIATED ISOTHERMAL AMPLIFICATION,LAMP)は迅速、高感度と特異性の強い等温核酸増幅技術であり、すでに各分野に広く応用されている。同時に、高感度も増幅時に交差汚染が発生しやすく、管検出技術を利用することによって、その汚染率を有効に下げることができる。本研究では、新しい金属指示薬-酸性絡ブルーK(ACID CHROME BLUE K, ACBK)を導入し、管のLAMP増幅と検出結果の可視化検出技術を確立した。まず第一に,LAMP増幅の開始システムにおいて,ACBKと緩衝液,DNTP,プライマー,およびMG(2+)の成分をそれぞれテストし,そして,ACBKを含むLAMPシステムの色変化がMG(2+)によって決定されることを決定した。化学的方法もこの結論をさらに検証した。その後、LAMP検査システムにおけるACBK指示薬の濃度とMG(2+)の濃度に対して選択と最適化を行い、最終的に25ΜLの増幅系におけるACBKの検出濃度を選択した。2ΜL 0.04% ACBK,MG(2+)濃度;6MMOL/L。 -ACBK-LAMPの検出システムを, 遺伝子(終了 OF NOPALINE SYNTHASE GENE,TNOS)を標的遺伝子として構築した。確立したシステムの検出感度は,トランスジェニックイネの検出限界に対して100コピーであった。50NGのイネ(ORYZA SATIVA),ダイズ(GLYCINE MAX),アブラナ(BRASSICA NAPUS)およびトウモロコシ(ZEA MAYS)のゲノムにおいて,0.1%のトランスジェニック含有量が検出された。同時に、異なる転化事件及び異なる作物の遺伝子組み換え材料を用いて、その検出特異性を検証した結果、構築したTNOS-ACBK-LAMPの検出システムは強い検出特異性を有することが分かった。最終的に,この検出システムを実際のトウモロコシ試料の遺伝子組み換え成分の検出に成功裏に適用し,検出結果は直接紫外可視スペクトルによって分析することができた。この方法の確立は遺伝子組み換え成分の検出速度を高めることができ、同時に等温増幅方法の判断に新たな構想を提供した。Data from the ScienceChina, LCAS. Translated by JST【JST・京大機械翻訳】

シソーラス用語： 高感度 ,  検出法 ,  最適化 ,  指示薬 ,  *酸性 ,  ゲノム ,  遺伝子 ,  検出限界 ,  ダイズ
準シソーラス用語： 遺伝子組換 ,  トランスジェニックイネ ,  標的遺伝子 ,  特異性 ,  *検知システム ,  *LAMP , 【Automatic Indexing@JST】

著者キーワード (5件)： Loop mediated isothermal amplification (LAMP) ,  Acid chrome blue K (ACBK) ,  Metal indicator ,  Visualization ,  Terminator of nopaline synthase gene(TNOS) terminator

分類 (1件)： 分析機器  (CC02020S)

タイトルに関連する用語 (5件)： 可視化 ,  検出システム ,  錯化剤 ,  酸性 ,  応用