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J-GLOBAL ID:201702291661978570   整理番号:17A0533261

枯草菌のチオレドキシン還元酵素の原核発現と活性分析【JST・京大機械翻訳】

Prokaryotic expression and activity analysis of thioredoxin reductase from Bacillus subtilis
著者 (4件):
資料名:
巻: 28  号: 12  ページ: 2054-2059  発行年: 2016年 
JST資料番号: C3051A  ISSN: 1004-1524  資料種別: 逐次刊行物 (A)
記事区分: 原著論文  発行国: 中国 (CHN)  言語: 中国語 (ZH)
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チオレドキシン還元酵素(TRXR)はNADPH依存性で、セレン含有のフラビンであり、細胞の増殖と分化、細胞内外の酸化還元バランスの維持において重要な役割を果たす。遺伝子特異的プライマーを用いて,枯草菌BS04菌株からTRXR遺伝子を増幅し,PET-28A(+)原核生物発現ベクターにサブクローニングし,大腸菌BL21(DE3)に形質転換した。IPTG誘導後,NIアフィニティークロマトグラフィーにより組換蛋白質の精製と活性分析を行った。その結果,枯草菌04株のTRXR遺伝子の全長は1BPであり,336アミノ酸をコードし,既知の枯草菌との99%の相同性を示した。SDS-PAGE電気泳動とWESTERN-BLOTTING分析により、組換えタンパク質の分子量は約37KUであり、予想と一致することが分かった。DTNBの還元活性測定と酵素動力学の結果によると、DTNBは高い還元活性を持ち、そのK_MとK_(CAT)値はそれぞれ3.06MMOL・L(-1)と324.71MIN-1本研究の結果は,TRXRの機能を理解するための参照を提供した。Data from the ScienceChina, LCAS. Translated by JST【JST・京大機械翻訳】
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分類 (2件):
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遺伝子操作  ,  遺伝子発現 

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