特許
J-GLOBAL ID:201403070149076127
宿主DNAの改変方法および選択マーカーカセット
発明者:
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出願人/特許権者:
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代理人 (9件):
飯田 敏三
, 野明 千雪
, 星野 宏和
, 宮前 尚祐
, 佐々木 渉
, 飯田 敏三
, 星野 宏和
, 宮前 尚祐
, 佐々木 渉
公報種別:特許公報
出願番号(国際出願番号):特願2009-044193
公開番号(公開出願番号):特開2009-254350
特許番号:特許第5524492号
出願日: 2009年02月26日
公開日(公表日): 2009年11月05日
請求項(抜粋):
【請求項1】 供与体DNAと宿主DNAとの間で相同組み換えを行う工程を含む宿主DNAの欠失対象領域を欠失させる方法であって、
前記供与体DNAが、宿主DNA中の、前記欠失対象領域の外側の5’側領域、前記欠失対象領域の外側の3’側領域及び前記欠失対象領域の内側の第1相同組み換え領域に対応する相同領域をこの順で有し、更に前記3’側領域の相同領域及び前記第1相同組み換え領域の相同領域の間に第1選択マーカー遺伝子、発現誘導型プロモーター及び当該発現誘導型プロモーターの制御下に発現可能な第2選択マーカー遺伝子を有し、
前記供与体DNAと前記宿主DNAとの間において、前記5’側領域及び前記第1相同組み換え領域で相同組み換えを行う第1工程と、
上記相同組み換え後の宿主DNAにおいて、宿主DNA由来の前記3’側領域と供与体DNA由来の前記3’側領域との間で相同組み換えを行う第2工程とを含み、
上記第1工程では、前記供与体DNAを組み込んだ宿主を前記第1選択マーカー遺伝子の発現に基づいて選択し、
前記第2工程では、前記発現誘導型プロモーターの発現誘導条件下とすることで前記第2の選択マーカー遺伝子の発現に基づいて、宿主DNA中の欠失対象領域が欠失した宿主を選択することを特徴とする、宿主DNAの欠失対象領域の欠失方法。
IPC (2件):
C12N 15/09 ( 200 6.01)
, C12N 1/21 ( 200 6.01)
FI (2件):
C12N 15/00 ZNA A
, C12N 1/21
引用特許:
引用文献:
審査官引用 (5件)
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Nucl. Acids Res., 2006, Vol. 34, No. 9, e71
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Nucl. Acids Res., 200806, Vol. 36, No. 14, e84
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Mol. Microbiol., 2002, Vol. 46, No. 1, P. 25-36
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