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J-GLOBAL ID：201702239204047112   整理番号：17A0170696

TRICHODERMA VIRIDEにおける繊維遺伝子のクローニングとその発現を同定した。【JST・京大機械翻訳】

Cloning, Expression and Identification of Trichoderma viride Cellobiohydrolase Gene in Lactic Acid Bacteria

著者 (7件)： Wang Cuiyan (College of Food Science and Engineering, Jilin Agricultural University) ,  Wang Yuhua (College of Food Science and Engineering, Jilin Agricultural University) ,  Piao Chunhong (College of Food Science and Engineering, Jilin Agricultural University) ,  Liu Junmei (College of Food Science and Engineering, Jilin Agricultural University, Division of Soybean Processing, Soybean Research & Development Center) ,  Hu Yaohui (College of Food Science and Engineering, Jilin Agricultural University) ,  Ren Dayong (College of Food Science and Engineering, Jilin Agricultural University) ,  Yu Hansong (College of Food Science and Engineering, Jilin Agricultural University)
資料名： Shipin Kexue  (Shipin Kexue)
巻： 37  号： 19  ページ： 141-146  発行年： 2016年 
JST資料番号： C2151A  ISSN： 1002-6630  資料種別： 逐次刊行物 (A)
記事区分： 原著論文  発行国： 中国 (CHN)  言語： 中国語 (ZH)

抄録/ポイント： 本研究では,乳酸菌発現システムを用いて,TRICHODERMA VIRIDEにおける繊維II遺伝子の発現を研究した。GENBANKに発表されたTRICHODERMA VIRIDE CBH II遺伝子(GENBANK登録番号:M55080)を参考にして、プライマーを設計し、ポリメラーゼ連鎖反応によりクローニングし、そのCDNA配列の長さは1BPであることが分かった。この酵素を分泌する目的を達成するために,その遺伝子の上流配列に大きさ80BPのシグナルペプチド配列を加えた。さらに,バイオインフォマティクス法によりコドンを乳酸菌の選好性により最適化し,全遺伝子合成により最適化されたCBH遺伝子を得た。この遺伝子をシャトル発現ベクターベクター36Eに連結し、原核発現ベクターベクター36E-S-CBHIIを構築した。電気泳動法を用いて、それを乳酸乳球菌のNZ3900細胞に組み換え、組換え乳酸菌を構築し、精製した株タンパク質をドデシル硫酸ナトリウムポリアクリルアミドゲル電気泳動により測定し、約53KDの目的タンパク質バンドを得て、予想された大きさと一致した。3,5-ジニトロ酸法による培地上清中の加水分解セルラーゼの活性は16.7U/MLに達し,菌体上清の上清と菌体の沈殿はほとんど酵素活性を持たなかった。結果は,繊維遺伝子のシグナルペプチド配列が乳によって正しく認識され,細胞外発現が成功裏に達成されたことを示した。Data from the ScienceChina, LCAS. Translated by JST【JST・京大機械翻訳】

シソーラス用語： ベクター ,  PCR法 ,  コドン ,  *遺伝子 ,  嗜好性 ,  セルラーゼ ,  シグナルペプチド ,  最適化 ,  乳酸菌 ,  酵素活性度 ,  脂肪族アルコール ,  無機酸エステル ,  脂肪族カルボン酸 ,  第二アルコール ,  ヒドロキシ酸
準シソーラス用語： 発現ベクター ,  バイオインフォマティクス ,  *クローニング , 【Automatic Indexing@JST】

著者キーワード (5件)： Trichoderma viride ,  cellulase ,  cbhII gene ,  Lactococcus lactis ,  cellubiohydrolase activity

分類 (3件)： 酵素一般  (EB09010D) ,  遺伝子の構造と化学  (EC02020U) ,  遺伝子発現  (EC02040Q)

物質索引 (2件)： ドデシル硫酸ナトリウム ,  乳酸

タイトルに関連する用語 (6件)： Trichoderma ,  繊維 ,  遺伝子 ,  クローニング ,  発現 ,  同定