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J-GLOBAL ID:201702253157284921   整理番号:17A0317224

Fomitiporia mediterranea MF3/22からの非モジュールヒドロラーゼファミリー5エンドグルカナーゼの加工性と触媒活性に寄与する余分な炭水化物結合モジュール【Powered by NICT】

Extra carbohydrate binding module contributes to the processivity and catalytic activity of a non-modular hydrolase family 5 endoglucanase from Fomitiporia mediterranea MF3/22
著者 (5件):
資料名:
巻: 91  ページ: 42-51  発行年: 2016年 
JST資料番号: A0989B  ISSN: 0141-0229  資料種別: 逐次刊行物 (A)
記事区分: 原著論文  発行国: アメリカ合衆国 (USA)  言語: 英語 (EN)
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Fomitiporia mediterraneaからFmEGはN末端及びC末端で312 アミノ酸GH5触媒ドメイン(CD)で24 アミノ酸拡張と13 アミノ酸リンカーのようなペプチドから成る非モジュールエンドグルカナーゼである。本研究では,余分なファミリー1炭水化物結合モジュール(CBM1)を有するN末端断片または融合の欠損を有する六FmEG誘導体はFmEG処理能力と触媒活性にCBM1の寄与を評価するために構築した。FmEGは弱い処理能力を示し,濾紙(FP)からの少量の最終生成物として主要な最終産物,セロトリオース(G4)としてセロビオース(G2)およびセロトリオース(G3)を放出したが,より多くG4の再生非晶質セルロース(RAC)から放出された。すべての誘導体は同じ最適pH(7.0)と温度(50°C)とカルボキシメチルセルロース(CMC)に類似した活性を有していた。しかし,余分なCBM1を融合FmEG△24またはFmEG△37への柔軟なペプチドを有つFabry-PerotおよびRACへの処理能力と触媒活性を有意に改善した。全体として,1.791火成活動及び18.4億年折畳みはFPに及ぼす可溶性/不溶性生成物比の増加,FmEGΔ24と比較して,RACに,1.38と1.39,倍増加はCBM1FmEGΔ24とCBM1リンカーFmEG△24でそれぞれ記録された。一方,RACにと2.66倍以上活性及びFPに1.60,1.68及び1.77,折畳みをdisplaidであった。FmEGΔ37と比較して同様の改良が,CBM1リンカーFmEG△37で得られた。興味深いことに,FmEGと余分なCBM1の融合も不溶性セルロースへの開裂パターンの変化を引き起こした。著者らの結果は,処理能力と触媒活性におけるこのような改善はCBM1結合親和性から生じる可能性があることを示唆した。N末端,24または37 アミノ酸は処理能力と触媒活性に必要な二ドメインの十分な空間分離のためのリンカーとして役立つ可能性がある。添加では,N末端,24または37 アミノ酸の欠失は,熱安定性ではなく酵素活性の有意な減少をもたらした。Copyright 2017 Elsevier B.V., Amsterdam. All rights reserved. Translated from English into Japanese by JST.【Powered by NICT】
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酵素一般  ,  微生物酵素の生産 
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