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J-GLOBAL ID：200902241925994129   整理番号：08A0581786

過剰発現されて封入体を形成する組換え型有機溶媒安定性リパーゼのリフォールディングとリパーゼ特異的フォールダーゼによる活性化

Refolding of a recombinant organic solvent-stable lipase, which is overexpressed and forms an inclusion body, and activation with lipase-specific foldase

著者 (6件)： OGINO Hiroyasu (Dep. of Chemical Engineering, Osaka Prefecture Univ., 1-1 Gakuen-cho, Naka-ku, Sakai, Osaka 599-8531, JPN) ,  INOUE Sosuke (Dep. of Chemical Engineering, Osaka Prefecture Univ., 1-1 Gakuen-cho, Naka-ku, Sakai, Osaka 599-8531, JPN) ,  AKAGI Rieko (Dep. of Chemical Engineering, Osaka Prefecture Univ., 1-1 Gakuen-cho, Naka-ku, Sakai, Osaka 599-8531, JPN) ,  YASUDA Masahiro (Dep. of Chemical Engineering, Osaka Prefecture Univ., 1-1 Gakuen-cho, Naka-ku, Sakai, Osaka 599-8531, JPN) ,  DOUKYU Noriyuki (Dep. of Life Sciences, Toyo Univ., Oura-gun, Gunma 374-0193, JPN) ,  ISHIMI Kosaku (Dep. of Chemical Engineering, Osaka Prefecture Univ., 1-1 Gakuen-cho, Naka-ku, Sakai, Osaka 599-8531, JPN)
資料名： Biochemical Engineering Journal  (Biochemical Engineering Journal)
巻： 40  号： 3  ページ： 507-511  発行年： 2008年07月01日 
JST資料番号： W1014A  ISSN： 1369-703X  資料種別： 逐次刊行物 (A)
記事区分： 原著論文  発行国： オランダ (NLD)  言語： 英語 (EN)

抄録/ポイント： 有機溶媒耐性のPseudomonas aeruginosa LST-03からの有機溶媒に安定なLST-03リパーゼの過剰発現が,組換えEscherichia coli系を用いて試みられた。それはリパーゼのシグナルペプチドの削除とT7プロモーターの使用によって達成された。発現されたリパーゼはE.coliでは封入体を形成したが,それは4Mの尿素と0.05Mのジチオトレイトールで完全に可溶化された。リパーゼ封入体の可溶化に用いられた変性剤は希釈または透析によって容易に除去された。可溶化リパーゼはリパーゼ特異的フォールダーゼとの培養によって効果的に活性化された。封入体から回収されたリパーゼの純度は高かった。組換えE.coli系の使用は,P.aeruginosa LST-03を用いた最初の系と比べて,高純度のリパーゼの生産性を約807倍に改善した。Copyright 2008 Elsevier B.V., Amsterdam. All rights reserved. Translated from English into Japanese by JST.

シソーラス用語： *リパーゼ ,  遺伝子発現 ,  形質転換 ,  大腸菌 ,  緑膿菌 ,  *封入体 ,  有機溶媒 ,  活性化 ,  組換タンパク質 ,  シグナルペプチド ,  可溶化 ,  酵素生産 ,  シャペロンタンパク質 ,  プロモーター領域 ,  酵素 ,  *折畳み
準シソーラス用語： Escherichia coli ,  Pseudomonas aeruginosa ,  T7プロモーター ,  シャペロニン ,  フォールダーゼ ,  リフォールディング

分類 (1件)： 微生物酵素の生産  (FK03030L)

引用文献 (26件)：

• H. Ogino, Organic solvent-stable enzymes, in: K.S. Siddiqui, T. Thomas (Eds.), Protein Adaptation in Extremophiles, Nova Science Publishers, Inc., New York, in press.
• H. Ogino, H. Ishikawa, Enzymes which are stable in the presence of organic solvents, J. Biosci. Bioeng. 91 (2001) 109-116.
• H. Ogino, K. Miyamoto, H. Ishikawa, Organic-solvent-tolerant bacterium which secretes organic-solvent-stable lipolytic enzyme, Appl. Environ. Microbiol. 60 (1994) 3884-3886.
• H. Ogino, K. Miyamoto, M. Yasuda, K. Ishimi, H. Ishikawa, Growth of organic solvent-tolerant Pseudomonas aeruginosa LST-03 in the presence of various organic solvents and production of lipolytic enzyme in the presence of cyclohexane, Biochem. Eng. J. 4 (1999) 1-6.
• H. Ogino, S. Nakagawa, K. Shinya, T. Muto, N. Fujimura, M. Yasuda, H. Ishikawa, Purification and characterization of organic solvent-stable lipase from organic solvent-tolerant Pseudomonas aeruginosa LST-03, J. Biosci. Bioeng. 89 (2000) 451-457.

タイトルに関連する用語 (8件)： 過剰発現 ,  封入体 ,  組換え型 ,  有機溶媒 ,  安定性 ,  リパーゼ ,  リフォールディング ,  活性化