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J-GLOBAL ID：200902247971726536   整理番号：09A0552180

樹脂ビーズに固定化したイオンチャネル蛋白質の電流記録

Current Recordings of Ion Channel Proteins Immobilized on Resin Beads

著者 (5件)： HIRANO Minako (Osaka Univ., Osaka, JPN) ,  TAKEUCHI Yuko (Osaka Univ., Osaka, JPN) ,  AOKI Takaaki (Osaka Univ., Osaka, JPN) ,  YANAGIDA Toshio (Osaka Univ., Osaka, JPN) ,  IDE Toru (Osaka Univ., Osaka, JPN)
資料名： Analytical Chemistry  (Analytical Chemistry)
巻： 81  号： 8  ページ： 3151-3154  発行年： 2009年04月15日 
JST資料番号： A0395A  ISSN： 0003-2700  CODEN： ANCHAM  資料種別： 逐次刊行物 (A)
記事区分： 原著論文  発行国： アメリカ合衆国 (USA)  言語： 英語 (EN)

抄録/ポイント： イオンチャネル電流の測定は,突然変異体の構築,細胞チャネルの発現,細胞膜からのこれらチャネルの抽出,プロテオリポソームへの再構成,平面二分子層法またはパッチクランプ法による導電性電気生理学的分析などを含む一連の操作手順によるもので,カリウムチャネルであるKcsAチャネル及びMthKチャネルに適用されている。しかしながら,この方法には高濃度チャンネル蛋白質が必要なことや,リポソームへのチャネル再構成に時間を要するなどの欠点がある。本研究では,イオンチャネル電流を測定するための,リポソーム再構成を用いないで,現行法よりも効率的に測定することができる方法を示した。この方法は,チャネルにヒスチジンタグとコバルトアフィニティゲルビーズを結合させ,ビーズに脂質二分子膜を形成させるもので,KcsAチャネル及びMthKチャネルに適用した。この方法によれば,チャネルを二分子層に組み込むことができ,チャネル電流を迅速かつ容易な測定と低濃度蛋白質について効率的な電流の記録を行うことができた。さらにヒスチジンタグによってチャネル方向を決定することができた。この方法は種々のチャンネル蛋白質及びチャネル研究に適用できる潜在能力を有しており,界面活性剤で可溶化したVDAC,RyRなどの二分子層へ直接に組み込んだチャネルにも適用できることが期待された。またアガロースがリン脂質膜と強く相互作用しないため,種々の方法によってアガロースビーズ上に安定化することができる多くのチャンネルタンパク質にも適用が可能なようであり,バイオセンサ研究のようないくつかの分野にも適用できそうである。

シソーラス用語： *カリウムチャンネル ,  *イオン電流 ,  *電流測定 ,  固定 ,  粒状材 ,  プラスチック ,  リポソーム ,  再構成 ,  標識 ,  コバルト ,  ゲル ,  脂質二分子膜 ,  多糖類 ,  突然変異体 ,  形質発現 ,  細胞膜 ,  電流電圧特性 ,  電極過程 ,  アミノ酸 ,  窒素複素環化合物 ,  第一アミン
準シソーラス用語： *KcsA ,  *MthK ,  アガロース

分類 (2件)： 蛋白質・ペプチド一般  (EB03010N) ,  電気分析一般  (CC05010C)

物質索引 (1件)： ヒスチジン

タイトルに関連する用語 (3件)： ビーズ ,  イオンチャネル ,  蛋白質