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J-GLOBAL ID：200902272821305782   整理番号：09A0971850

Lactococcus lactis MG1363由来のグルコサミニダーゼの分子特性:変異解析及び生化学的解析

Molecular properties of the glucosaminidase AcmA from Lactococcus lactis MG1363: Mutational and biochemical analyses

著者 (9件)： INAGAKI Nobuya (Molecular Biology Group, Graduate School of Sci. and Engineering, Univ. of Toyama, 3190 Gofuku, Toyama 930-8555, JPN) ,  IGUCHI Akinori (Molecular Biology Group, Graduate School of Sci. and Engineering, Univ. of Toyama, 3190 Gofuku, Toyama 930-8555, JPN) ,  YOKOYAMA Takahiro (Molecular Biology Group, Graduate School of Sci. and Engineering, Univ. of Toyama, 3190 Gofuku, Toyama 930-8555, JPN) ,  YOKOI Ken-ji (Molecular Biology Group, Graduate School of Sci. and Engineering, Univ. of Toyama, 3190 Gofuku, Toyama 930-8555, JPN) ,  YOKOI Ken-ji (Toyama Prefectural Food Res. Inst., 360 Yoshioka, Toyama 939-8153, JPN) ,  ONO Yasushi (Molecular Biology Group, Graduate School of Sci. and Engineering, Univ. of Toyama, 3190 Gofuku, Toyama 930-8555, JPN) ,  YAMAKAWA Ayanori (Biochemistry Div., Dep. of Materials Sci., Wakayama National Coll. of Technol., 77 Nada, Gobo, Wakayama 644-0023, JPN) ,  TAKETO Akira (Dep. of Applied Physics and Chemistry, Fukui Univ. of Technol., Gakuen, Fukui 910-8505, JPN) ,  KODAIRA Ken-ichi (Molecular Biology Group, Graduate School of Sci. and Engineering, Univ. of Toyama, 3190 Gofuku, Toyama 930-8555, JPN)
資料名： Gene  (Gene)
巻： 447  号： 2  ページ： 61-71  発行年： 2009年11月15日 
JST資料番号： E0701B  ISSN： 0378-1119  資料種別： 逐次刊行物 (A)
記事区分： 原著論文  発行国： オランダ (NLD)  言語： 英語 (EN)

抄録/ポイント： Lactococcus lactis ssp.cremoris MG1363の主要自己溶菌酵素AcmAはN末端シグナル配列,中央酵素領域(グルコサミニダーゼとしてのglu_acma),及びC末端細胞認識ドメイン(LysM123)からなるモジュール蛋白質である。glu_acma(約160アミノ酸)はグリコシドヒドロラーゼ(GH)73ファミリーに属し,2つの酸性残基E128とD153が触媒作用に重要であると考えられている。本研究では,初めにAcmAのアミノ酸置換解析を大腸菌系で行った。点変異E94A,E94Q,E128A,D153A及びY191Aは細胞溶解活性を著しく減少したが(それぞれ3.8%,1.1%,4.2%,4.8%,2.4%),E128QとD153Nは有意な残効性を保持した(それぞれ32.1%,44.0%)。一方,Y191FとY191Wは高い活性を維持した(それぞれ66.2%と46.0%)。こうした結果はE94(E128やD153より)と芳香族残基Y191が,AcmAの触媒作用においておそらく重要な役割を果たしていると示した。Staphylococcus warneri M自己溶菌酵素Atl_WM由来の他のGH73グルコサミニダーゼGlu_atlwmの変異解析も考慮し,こうした結果は,GH20メンバーに想定されたように,GH73メンバーもグリコシド結合を基質支援機構を通じて開裂すると示唆した。AcmAとGlu_atlwmを大腸菌組換え体細胞から精製してその酵素特性を調べた。Copyright 2009 Elsevier B.V., Amsterdam. All rights reserved. Translated from English into Japanese by JST.

シソーラス用語： *グルコサミニダーゼ ,  タンパク質 ,  シグナルペプチド ,  *触媒反応 ,  *活性部位 ,  塩基対置換 ,  タンパク質工学 ,  突然変異体 ,  アミノ酸配列 ,  Lactococcus lactis ,  アミノ酸置換 ,  微生物
準シソーラス用語： 乳酸連鎖球菌 ,  AcmA蛋白質 ,  オートリジン ,  シグナル配列

分類 (2件)： 微生物の生化学  (EG03020N) ,  酵素一般  (EB09010D)

タイトルに関連する用語 (6件)： Lactococcus ,  グルコサミニダーゼ ,  分子特性 ,  変異解析 ,  生化学 ,  解析