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J-GLOBAL ID：200902274497526510   整理番号：08A0224436

in vivo DNA合成の急速で高感度の検出のための化学的方法

A chemical method for fast and sensitive detection of DNA synthesis in vivo

著者 (2件)： SALIC Adrian (Harvard Medical School, MA) ,  MITCHISON Timothy J. (Harvard Medical School, MA)
資料名： Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America  (Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America)
巻： 105  号： 7  ページ： 2415-2420  発行年： 2008年02月19日 
JST資料番号： D0387A  ISSN： 0027-8424  資料種別： 逐次刊行物 (A)
記事区分： 原著論文  発行国： アメリカ合衆国 (USA)  言語： 英語 (EN)

抄録/ポイント： 増殖細胞におけるDNA合成の検出は細胞周期S相中に標識DNA前躯体の細胞DNAへの結合に依存する。[³H]チミジンと5-ブロモ-2′-デオキシウリジン(BrdU)標識法は細胞周期動態の研究に有用であるが,課題がある。今回,5-エチニル-2′-デオキシウリジン(EdU),ピリミジン環5位メチル基に代わって末端アルキン基を運び,DNA複製中の細胞DNAに結合するチミジンアナログを用い,末端アルキン基をCu(I)触媒[3+2]付加環化反応を介し蛍光アジドにより増殖細胞のDNA合成を検出した。検出に用いる小径の蛍光アジドは高い組織浸透性を示し,組織や器官移植物の全体標本の染色を可能とした。この方法はBrdU検出法より高感度で迅速であり,試料固定やDNA変性を必要とせず,良好な構造保持を示した。本方法は培養細胞や丸ごとの動物の腸管や脳の解析に提供しうると結論した。

シソーラス用語： *DNA合成 ,  検出法 ,  *高感度 ,  細胞増殖 ,  細胞周期 ,  デオキシリボヌクレオシド ,  *標識法 ,  窒素複素環化合物 ,  キノン ,  銅 ,  環状付加 ,  蛍光 ,  アジド ,  浸透率 ,  移植片 ,  生体試料染色 ,  生体試料固定 ,  変性 ,  培養細胞 ,  *DNA複製 ,  アフリカツメガエル ,  卵子 ,  3T3細胞 ,  ピリミジンヌクレオシド ,  有機臭素化合物 ,  多価フェノール ,  芳香族縮合化合物 ,  NIH 3T3細胞 ,  ピパ科

分類 (2件)： 生体の顕微鏡観察法  (EA03050C) ,  分子遺伝学一般  (EC02010J)

物質索引 (5件)： 5-エチニル-2′-デオキシウリジン ,  5-ブロモ-2′-デオキシウリジン ,  アルキン ,  チミジン ,  ピリミジン

タイトルに関連する用語 (4件)： DNA合成 ,  急速 ,  高感度 ,  化学