弱化3’-5’エキソヌクレアーゼ活性を有する熱安定性又は熱活性DNAポリメラーゼ

発明者： , ,
出願人/特許権者：
代理人 (1件)：細田芳徳
公報種別：公開公報
出願番号（国際出願番号）：特願2003-099762
公開番号（公開出願番号）：特開2003-304870
出願日： 2003年04月02日
公開日（公表日）： 2003年10月28日
要約：

【要約】【課題】PCR等に用いた場合、高い忠実度で、高い複製効率で、迅速かつ経済的に核酸合成を行なうことを可能にしうる熱安定性または熱活性DNAポリメラーゼ、を提供すること。【解決手段】弱化3’-5’エキソヌクレアーゼ活性を呈する、単離された熱安定性又は熱活性DNAポリメラーゼ。

請求項（抜粋）：

下記配列モチーフ:(a) 式DX1EX2X3SX4(式中、Dは、アスパラギン酸残基であり、X1は、任意のアミノ酸残基であるか、残基なしであり、Eは、グルタミン酸残基であり、X2は、任意のアミノ酸残基であり、X3は、任意のアミノ酸残基であり、Sは、セリン残基であり、X4は、任意のアミノ酸残基である)を有する配列モチーフ、又は(b) 式X5X6X7X8X9X10X11X12X13X14 (配列番号:1)(式中、X5は、任意のアミノ酸残基であり、X6は、任意のアミノ酸残基であり、X7は、システイン残基若しくはロイシン残基であり、X8は、任意のアミノ酸残基であり、X9は、フェニルアラニン残基若しくはチロシン残基であり、X10は、任意のアミノ酸残基であり、X11は、任意のアミノ酸残基であり、X12は、任意のアミノ酸残基であり、X13は、イソロイシン残基若しくはバリン残基であり、X14は、ロイシン残基若しくはフェニルアラニン残基である)を有する配列モチーフ、又は(c) 式DX15X16X17X18X19YX20X21X22X23 (配列番号:2)(式中、Dは、アスパラギン酸残基であり、X15は、プロリン残基、アラニン残基、ロイシン残基若しくはスレオニン残基であり、X16は、ロイシン残基若しくはメチオニン残基でありX17は、ロイシン残基若しくはイソロイシン残基であり、X18は、任意のアミノ酸残基であり、X19は、アラニン残基若しくはセリン残基であり、Yは、チロシン残基であり、X20は、ロイシン残基、イソロイシン残基若しくはバリン残基であり、X21は、ロイシン残基若しくはトリプトファン残基であり、X22は、アスパラギン酸残基、アスパラギン残基、グルタミン酸残基若しくはグルタミン残基であり、X23は、プロリン残基若しくはセリン残基である)を有する配列モチーフ、又は(d) 式X24X25X26X27X28X29X30X31X32X33X34X35X36 (配列番号:3)(式中、X24は、プロリン残基若しくはアラニン残基であり、X25は、任意のアミノ酸残基であり、X26は、グルタミン酸残基、アスパラギン酸残基若しくはプロリン残基であり、X27は、リジン残基、アルギニン残基若しくはグルタミン酸残基であり、X28は、任意のアミノ酸残基であり、X29は、任意のアミノ酸残基であり、X30は、グルタミン酸残基、アルギニン残基若しくはアスパラギン残基でありX31は、任意のアミノ酸残基であり、X32は、セリン残基、アラニン残基若しくはシステイン残基であり、X33は、任意のアミノ酸残基であり、X34は、グルタミン酸残基若しくはスレオニン残基であり、X35は、任意のアミノ酸残基であり、X36は、アラニン残基である)を有する配列モチーフから選択された配列モチーフを含有した3’-5’エキソヌクレアーゼドメインを含有し、かつ標準アッセイを用いて測定した場合、約6.5以下であるが0U/pmolより高い弱化3’-5’エキソヌクレアーゼ活性を呈する、単離された熱安定性又は熱活性DNAポリメラーゼ。

IPC (2件)：

C12N 9/12 ZNA , C12N 15/09

FI (2件)：

C12N 9/12 ZNA , C12N 15/00 A

Fターム (11件)：

4B024AA20 , 4B024BA10 , 4B024CA02 , 4B024DA06 , 4B024EA04 , 4B024HA01 , 4B050CC05 , 4B050DD02 , 4B050FF09E , 4B050FF14E , 4B050LL10

引用特許：

出願人引用 (19件)

米国特許第4,683,202号
米国特許第5,420,029号
米国特許第6,015,668号

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審査官引用 (2件)

変性キメラDNAポリメラーゼ
公報種別：公開公報出願番号：特願平10-208533 出願人：エフ・ホフマン-ラロシユアーゲー
特許第5948614号

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