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J-GLOBAL ID:201002277413748857   整理番号:10A0580051

枯草菌における異種分泌蛋白質の産生のための染色体に局在するT7発現系の構築

Construction of Chromosomally Located T7 Expression System for Production of Heterologous Secreted Proteins in Bacillus subtilis
著者 (5件):
資料名:
巻: 58  号:ページ: 5392-5399  発行年: 2010年05月12日 
JST資料番号: C0251A  ISSN: 0021-8561  CODEN: JAFCAU  資料種別: 逐次刊行物 (A)
記事区分: 原著論文  発行国: アメリカ合衆国 (USA)  言語: 英語 (EN)
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プラスミドを用いた組換蛋白質の発現の問題点を回避するために,枯草菌の染色体にT7発現系を再構築した。選抜マーカーと大腸菌由来のレプリコンの除去はヘルパープラスミドのpEKA-FLPが産生するFLPレコンビナーゼによって行った。かくして,枯草菌PT5株の細胞壁結合プロテアーゼをコードするwprAに,spacプロモーターと融合したT7遺伝子1のゲノムコピーを挿入した。同様に,細胞外プロテアーゼをコードするmprに,Thermomonospora fuscaのT7プロモーターと融合したナットウキナーゼまたはエンドグルカナーゼE1の遺伝子を挿入した。得られた遺伝子組込株はいずれも6種のプロテアーゼを欠き,24時間の誘導期を経て,それぞれ体積活性が10860CU/mLのナットウキナーゼと8.4U/mLのエンドグルカナーゼE1を分泌した。
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分類 (2件):
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酵素の応用関連  ,  遺伝子操作 
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