文献

J-GLOBAL ID：201002297450158416   整理番号：10A0648005

分泌型ルシフェラーゼレポーター系を介したin vivoとin vitroでのTTRとCMVプロモーターの比較

Comparison of TTR and CMV Promoters in vivo and in vitro via a Secreted Luciferase Reporter System

著者 (6件)： LUO Shun-tao (West China Hospital,Sichuan Univ., Sichuan, Chengdu) ,  TIAN Wen-hong (Inst. for Viral Disease Control and Prevention,Chinese Center for Disease Control and Prevention, Beijing) ,  WANG Gang (Inst. for Viral Disease Control and Prevention,Chinese Center for Disease Control and Prevention, Beijing) ,  DONG Xiao-yan (West China Hospital,Sichuan Univ., Sichuan, Chengdu) ,  YANG Li (West China Hospital,Sichuan Univ., Sichuan, Chengdu) ,  WU Xiao-bing (Inst. for Viral Disease Control and Prevention,Chinese Center for Disease Control and Prevention, Beijing)
資料名： Bingdu Xuebao  (Bingdu Xuebao)
巻： 25  号： 6  ページ： 424-429  発行年： 2009年 
JST資料番号： C2388A  ISSN： 1000-8721  資料種別： 逐次刊行物 (A)
記事区分： 原著論文  発行国： 中国 (CHN)  言語： 中国語 (ZH)

抄録/ポイント： GLuc(Gaussiaルシフェラーゼ)は高感度の分泌型ルシフェラーゼである。この研究で,容易に分泌し,高感度で簡便迅速なGLuc検出系を使ってP_TTRとP_CMVの発現特性をまず比較した。最初に,二種のプラスミド,pAAV2-neo-TTR-GlueとpAAV2-neo-CMV-GLucを作成した。その後,リポフェクタミン2000を使いこの二種のプラスミドを,肝臓細胞由来Huh7とHepG2と,非肝臓細胞株のHEK293とHeLaS3も含む四種の細胞株にトランスフェクトした。トランスフェクション後,様々な時間でこれらの細胞培養液上清中でのGLuc発現を測定した。さらに,水力学的送達手段により二種のプラスミドを異なる用量でBALB/cマウスに注射し,注射2時間後から尾先端血液2.5μlでのin vivoのGLuc発現を測定した。細胞アッセイの結果,CMVプロモーターによるGLuc発現はTTRプロモーターによるGLucより有意に高いことが示唆された。また,CMVプロモーターによるGLucのルシフェラーゼ活性は,HEK293とHeLaS3細胞株ではTTRプロモーターによるGLucより50~300倍高かったが,HepG2とHuh7細胞株ではTTRプロモーターのGLucより10倍も高くないことから,TTRプロモーターの相対的な肝臓特異性が示された。動物アッセイでは,より高いルシフェラーゼ活性が異なる用量の二種のプラスミドでのTTRプロモーター群よりCMVプロモーター群で認められた。しかし,二種のプロモーターの発現パターンは明らかに異なっていた。CMVプロモーターによるGLuc発現は注射後10時間で最高に達し,急速に減少した;一方,TTRプロモーターによるGLuc発現は48時間後に最高に達し,極めてゆっくりと減少した。P_TTRの発現強度はP_CMVより弱いが,P_TTRは駆動遺伝子発現を長時間維持できることを,これらの結果は示した。Data from the ScienceChina, LCAS. Translated by JST

シソーラス用語： *ルシフェラーゼ ,  レポーター遺伝子 ,  *サイトメガロウイルス ,  *プロモーター領域 ,  *プレアルブミン ,  遺伝子発現 ,  プラスミド ,  リポソーム ,  腫瘍細胞 ,  培養細胞 ,  HepG2細胞 ,  肝細胞 ,  HEK293細胞 ,  HeLa細胞 ,  トランスフェクション ,  細胞培養 ,  水力学 ,  マウス ,  実験動物 ,  酵素活性度 ,  経時変化 ,  Huh-7細胞 ,  HeLaS3細胞 ,  培養上清 ,  近交系BALB Cマウス ,  *微生物 ,  *ヘルペスウイルス科 ,  *アルブミン ,  *血清タンパク質 ,  分子遺伝現象 ,  薄膜 ,  二分子層 ,  脂質膜 ,  層 ,  多分子層 ,  多層 ,  脂質二分子膜 ,  ネズミ亜目
準シソーラス用語： *GLuc ,  BALB/Cマウス

分類 (1件)： 分子遺伝学一般  (EC02010J)

タイトルに関連する用語 (2件)： ルシフェラーゼ ,  CMVプロモーター