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J-GLOBAL ID：201102236131917035   整理番号：11A0618930

安定同位体スクランブルと希釈を回避する無細胞蛋白質合成の実用的方法

A practical method for cell-free protein synthesis to avoid stable isotope scrambling and dilution

著者 (9件)： YOKOYAMA Jun (RIKEN Systems and Structural Biology Center, Tsurumi, Yokohama 230-0045, JPN) ,  YOKOYAMA Jun (Dep. of Computational Intelligence and Systems Sci., Interdisciplinary Graduate School of Sci. and Engineering ...) ,  YOKOYAMA Jun (Tsukuba Lab., Taiyo Nippon Sanso, Tsukuba, Ibaraki 300-2611, JPN) ,  MATSUDA Takayoshi (RIKEN Systems and Structural Biology Center, Tsurumi, Yokohama 230-0045, JPN) ,  KOSHIBA Seizo (RIKEN Systems and Structural Biology Center, Tsurumi, Yokohama 230-0045, JPN) ,  KOSHIBA Seizo (Dep. of Supramolecular Biology, Graduate School of Nanobioscience, Yokohama City Univ., Tsurumi, Yokohama 230-0045, JPN) ,  TOCHIO Naoya (RIKEN Systems and Structural Biology Center, Tsurumi, Yokohama 230-0045, JPN) ,  KIGAWA Takanori (RIKEN Systems and Structural Biology Center, Tsurumi, Yokohama 230-0045, JPN) ,  KIGAWA Takanori (Dep. of Computational Intelligence and Systems Sci., Interdisciplinary Graduate School of Sci. and Engineering ...)
資料名： Analytical Biochemistry  (Analytical Biochemistry)
巻： 411  号： 2  ページ： 223-229  発行年： 2011年04月15日 
JST資料番号： H0177B  ISSN： 0003-2697  資料種別： 逐次刊行物 (A)
記事区分： 原著論文  発行国： オランダ (NLD)  言語： 英語 (EN)

抄録/ポイント： 最近,核磁気共鳴スペクトロスコーピーを用いた蛋白質構造分析の標的がより大きく,複雑になってきた。その結果,完全で正確な安定同位体標識法が望まれてきた。無細胞蛋白質合成系は,この目的に適している。現行研究で,大腸菌細胞抽出物に基づく無細胞蛋白質合成系を用いて,化学阻害剤による系の代謝反応を調節することにより,正確な完全¹⁵Nと²H標識を達成した。アミノオキシ酢酸,D-リンゴ酸,L-メチオニンスルホキシイミン,S-メチル-L-システインスルホキシイミン,6-ジアゾ-5-オキソ-L-ノルロイシン,5-ジアゾ-4-オキソ-L-ノルバリンの添加は,従来の無細胞系を用いた場合,厳しい同位体スクランブルと希釈に通常悩まされる,アスパラギン酸,アスパラギン,グルタミン酸,グルタミンでさえ,正確なアミノ酸選択¹⁵N標識に非常に効果的であった。²H標識に関して,従来系で普通に起こるH^αとH^β位置のバックプロトン化が,無細胞系へのアミノオキシ酢酸とD-リンゴ酸の簡単な添加により,メチオニンとシステインのH^α位置を除いて,劇的に抑制された。Copyright 2011 Elsevier B.V., Amsterdam. All rights reserved. Translated from English into Japanese by JST.

シソーラス用語： *標識法 ,  *タンパク質合成 ,  無細胞系 ,  大腸菌 ,  代謝調節 ,  重水素 ,  アミノ酸 ,  シャペロンタンパク質 ,  窒素15 ,  タンパク質 ,  DnaJ蛋白質 ,  *同位体標識 ,  *無細胞蛋白質合成 ,  微生物
準シソーラス用語： ユビキチン関連蛋白質

分類 (2件)： 標識化合物  (CB10050N) ,  化学合成  (EB03030J)

タイトルに関連する用語 (4件)： 安定同位体 ,  希釈 ,  回避 ,  無細胞蛋白質合成