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J-GLOBAL ID：201202204495333509   整理番号：12A1642901

プロテアーゼの非標識リアルタイム蛍光法および遊離ヘムによる阻害剤スクリーニング

A label-free real time fluorometric assay for protease and inhibitor screening with a released heme

著者 (8件)： LI Wenying (Changchun Inst. Applied Chemistry, Chinese Acad. Sci., Changchun, CHN) ,  LI Wenying (Graduate School, Chinese Acad. Sci., Beijing, CHN) ,  CHEN Jian (Changchun Inst. Applied Chemistry, Chinese Acad. Sci., Changchun, CHN) ,  JIAO Huping (Changchun Inst. Applied Chemistry, Chinese Acad. Sci., Changchun, CHN) ,  JIAO Huping (Graduate School, Chinese Acad. Sci., Beijing, CHN) ,  ZHANG Qingfeng (Changchun Inst. Applied Chemistry, Chinese Acad. Sci., Changchun, CHN) ,  ZHOU Huipeng (Changchun Inst. Applied Chemistry, Chinese Acad. Sci., Changchun, CHN) ,  YU Cong (Changchun Inst. Applied Chemistry, Chinese Acad. Sci., Changchun, CHN)
資料名： Chemical Communications  (Chemical Communications)
巻： 48  号： 81  ページ： 10123-10125  発行年： 2012年10月18日 
JST資料番号： D0376B  ISSN： 1359-7345  CODEN： CHCOFS  資料種別： 逐次刊行物 (A)
記事区分： 短報  発行国： イギリス (GBR)  言語： 英語 (EN)

抄録/ポイント： プロテアーゼ活性の蛍光法は,高感度で測定の容易さにより用いられているが,限界がある。今回,プロテアーゼ活性検出と阻害剤スクリーニングのための新規非標識測定法について報告した。モデルプロテアーゼとしてトリプシンを用い,ヘム含有ウシヘモグロビンを基質として選択した。ペリレンプローブで検出した。プローブは最大発光488nmで緑色蛍光を示し,トリプシン処理で蛍光強度は濃度依存性に減少した。動力学的パラメーターK_M値とV_max値はそれぞれ43.36μMと1.18μM/minであった。検出限界は2mU/mLであった。S1ヌクレアーゼ,アルカリ性ホスファターゼとリソチームは発光強度変化を示さなかった。ダイズと卵白のトリプシン阻害剤と塩酸ベンズアミジンは濃度依存性に阻害作用を示した。本方法は,簡単,高感度,選択性で,かつ安価であり,生物学的/生化学的応用におけるプロテアーゼ活性の検出に用い得ると結論した。

シソーラス用語： *プロテイナーゼ ,  実時間処理 ,  *蛍光計 ,  *ヘム ,  スクリーニング ,  トリプシン ,  ヘモグロビン ,  プローブ ,  放射強度 ,  濃度依存性 ,  検出限界 ,  ヌクレアーゼ ,  アルカリ性ホスファターゼ ,  リゾチーム ,  動力学 ,  酵素阻害剤 ,  芳香族縮合炭化水素
準シソーラス用語： S1ヌクレアーゼ ,  蛍光強度

分類 (2件)： バイオアッセイ  (EA03060N) ,  酵素一般  (EB09010D)

物質索引 (2件)： ベンズアミジン・塩酸塩 ,  ペリレン

タイトルに関連する用語 (7件)： プロテアーゼ ,  標識 ,  リアルタイム ,  蛍光 ,  ヘム ,  阻害剤 ,  スクリーニング