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J-GLOBAL ID：201202222501077402   整理番号：12A1773914

有機リン化合物に対する感度を改善するための古細菌Archaeoglobus fulgidusのカルボキシエステラーゼの活性部位の再設計

Redesigning the active site of a carboxyl esterase from the archaeon Archaeoglobus fulgidus to improve sensitivity to organophosphorus compounds

著者 (9件)： WANG Yuexi (State Key Lab. of Microbial Metabolism, Coll. of Life Sci. and Biotechnology, Shanghai Jiao Tong Univ., Shanghai ...) ,  WANG Yuexi (Key Lab. for Molecular Enzymology and Engineering of Ministry of Education, Jilin Univ., Changchun 130021, CHN) ,  LI Binchun (State Key Lab. of Microbial Metabolism, Coll. of Life Sci. and Biotechnology, Shanghai Jiao Tong Univ., Shanghai ...) ,  LI Binchun (Key Lab. for Molecular Enzymology and Engineering of Ministry of Education, Jilin Univ., Changchun 130021, CHN) ,  HAN Weiwei (Key Lab. for Molecular Enzymology and Engineering of Ministry of Education, Jilin Univ., Changchun 130021, CHN) ,  YANG Guangyu (State Key Lab. of Microbial Metabolism, Coll. of Life Sci. and Biotechnology, Shanghai Jiao Tong Univ., Shanghai ...) ,  ZHANG Zuoming (Key Lab. for Molecular Enzymology and Engineering of Ministry of Education, Jilin Univ., Changchun 130021, CHN) ,  FENG Yan (State Key Lab. of Microbial Metabolism, Coll. of Life Sci. and Biotechnology, Shanghai Jiao Tong Univ., Shanghai ...) ,  FENG Yan (Key Lab. for Molecular Enzymology and Engineering of Ministry of Education, Jilin Univ., Changchun 130021, CHN)
資料名： Process Biochemistry  (Process Biochemistry)
巻： 47  号： 12  ページ： 2219-2226  発行年： 2012年12月 
JST資料番号： C0250B  ISSN： 1359-5113  資料種別： 逐次刊行物 (A)
記事区分： 原著論文  発行国： イギリス (GBR)  言語： 英語 (EN)

抄録/ポイント： 有機リン化合物(OP)は,神経系のアセチルコリンエステラーゼ(AChE)の活性を阻害する能力により,農薬として広く使用されている。従って,AChEは農薬の検出のためのバイオセンサーとして,一般的に利用されている。AChEは不安定であることから,頑健な適用を目的として,より安定な酵素が望まれている。古細菌Archaeoglobus fulgidus由来の熱に安定性なカルボキシエステラーゼ(AFEST)について,7種類の選択したOPに対する感度を検討した。AFESTに対するジクロルボスのIC₅₀(50.8±2.6 nM)は市販のAChEのそれよりも10倍低かったことから,AFESTは高い感度を持つことが示された。その他のOPに対するAFESTの感度は,AChEよりも低かった。OPに対するAFESTの感度を亢進するために,AFESTのcapドメインに部位特異的突然変異を導入した。突然変異体N44S/S48Vの7種類のOPに対する感度は野生型に比べて亢進し,パラオキソン(3.3±0.01nM),ジクロルボス(28.0±0.6nM),プロフェノホス(43.0±1.0nM)およびダイアジノン(3.0±0.2nM)を含む4種類のOPに対してはAChEよりも高感度であった。AFESTと変異体N44S/S48Vの37°Cにおける半減期は15日以上であった。AFESTおよび変異体N44S/S48Vと選択したOPの間の相互作用を,分子ドッキングにより検討した。その結果,AFESTと変異体N44S/S48Vは,OP検出のためのバイオセンサーとしての可能性を有することが示された。Copyright 2012 Elsevier B.V., Amsterdam. All rights reserved. Translated from English into Japanese by JST.

シソーラス用語： 古細菌 ,  *有機リン化合物 ,  *カルボキシルエステラーゼ ,  活性部位 ,  タンパク質工学 ,  部位特異的変異誘発 ,  バイオセンサ ,  ドッキング ,  エノール ,  脂肪族アルコール ,  脂肪族塩素化合物 ,  無機酸エステル ,  窒素複素環化合物 ,  芳香族ニトロ化合物 ,  フェノール類 ,  チオール ,  芳香族塩素化合物 ,  芳香族臭素化合物
準シソーラス用語： Archaeoglobus fulgidus

分類 (1件)： 酵素一般  (EB09010D)

物質索引 (4件)： ジクロルボス ,  ダイアジノン ,  パラオキソン ,  プロフェノホス

タイトルに関連する用語 (7件)： 有機リン化合物 ,  感度 ,  古細菌 ,  Archaeoglobus ,  カルボキシエステラーゼ ,  活性部位 ,  設計