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J-GLOBAL ID：201202252072459977   整理番号：12A1719597

モノ-PEG化リゾチームのpH勾配クロマトグラフィーによるイソ型の分離と結合サイトの決定

Isoform separation and binding site determination of mono-PEGylated lysozyme with pH gradient chromatography

著者 (5件)： MAISER Benjamin (Inst. of Engineering in Life Sciences, Section IV: Biomolecular Separation Engineering, Karlsruhe Inst. of Technol. ...) ,  KROENER Frieder (Inst. of Engineering in Life Sciences, Section IV: Biomolecular Separation Engineering, Karlsruhe Inst. of Technol. ...) ,  DISMER Florian (Inst. of Engineering in Life Sciences, Section IV: Biomolecular Separation Engineering, Karlsruhe Inst. of Technol. ...) ,  BRENNER-WEISS Gerald (Inst. of Functional Interfaces, Karlsruhe Inst. of Technol. (KIT), 76344 Eggenstein-Leopoldshafen, DEU) ,  HUBBUCH Juergen (Inst. of Engineering in Life Sciences, Section IV: Biomolecular Separation Engineering, Karlsruhe Inst. of Technol. ...)
資料名： Journal of Chromatography A  (Journal of Chromatography A)
巻： 1268  ページ： 102-108  発行年： 2012年12月14日 
JST資料番号： C0278B  ISSN： 0021-9673  資料種別： 逐次刊行物 (A)
記事区分： 原著論文  発行国： オランダ (NLD)  言語： 英語 (EN)

抄録/ポイント： PEG化として知られるPEGの共有結合は,現在,薬剤の薬物動態の改良のための主な方法の1つである。しかし,PEG化タンパク質の位置異性型の分離と特性化が,依然として大きな課題である。浅いイオン勾配によってイオン強度を増加させるイオン交換クロマトグラフィーの利用が,一般的な精製法である。本研究は,5kDa,及び10kDaのmPEG-アルデヒドによって修飾したモノ-PEG化リゾチームの6種のイソ型中の5種の分離に線型pH勾配クロマトグラフィーを適用する方法を報告する。対応するPEG化サイトを決定するために,それぞれのイソ型の等電点の計算値と溶出pH値の比較を利用した。得られる相関は,R²>0.99を示した。それぞれのピークのトリプシン消化とその後のMALDI-MS分析は,予測される溶出順序を実証した。UV面積に基づき,リジン1でのN-末端アミンが最大の活性を示し,次いでリジン38残基であった。Copyright 2012 Elsevier B.V., Amsterdam. All rights reserved. Translated from English into Japanese by JST.

シソーラス用語： *化学修飾 ,  *リゾチーム ,  *pH【水素イオン指数】 ,  *形態 ,  *結合部位 ,  *分離 ,  共有結合 ,  薬物動力学 ,  イオン強度 ,  構造異性体 ,  *イオン交換クロマトグラフィー ,  精製 ,  等電点 ,  数値 ,  MALDI-MS
準シソーラス用語： *PEG化 ,  *pH勾配 ,  *イソ型 ,  位置異性体 ,  計算値

分類 (2件)： クロマトグラフィー,電気泳動  (CC01050S) ,  酵素一般  (EB09010D)

タイトルに関連する用語 (6件)： PEG化 ,  リゾチーム ,  pH勾配 ,  クロマトグラフィー ,  イソ型 ,  結合サイト