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J-GLOBAL ID：201302220242489645   整理番号：13A1859433

多領域組み換えイムノトキシンの折畳みおよび凝集

Folding and aggregation of a multi-domain engineered immunotoxin

著者 (7件)： MAURER Ronald W. (Dep. of Chemical and Biomolecular Engineering, 150 Acad. St., Univ. of Delaware, Newark, DE 19716, USA) ,  HUNTER Alan K. (MedImmune, 1 MedImmune Way, Gaithersburg, MD 20878, USA) ,  WANG Xiangyang (MedImmune, 1 MedImmune Way, Gaithersburg, MD 20878, USA) ,  WANG William K. (MedImmune, 1 MedImmune Way, Gaithersburg, MD 20878, USA) ,  ROBINSON Anne S. (Dep. of Chemical and Biomolecular Engineering, 150 Acad. St., Univ. of Delaware, Newark, DE 19716, USA) ,  ROBINSON Anne S. (Dep. of Chemical and Biomolecular Engineering, 300 Lindy Boggs Lab., Tulane Univ., New Orleans, LA 70118, USA) ,  ROBERTS Christopher J. (Dep. of Chemical and Biomolecular Engineering, 150 Acad. St., Univ. of Delaware, Newark, DE 19716, USA)
資料名： Biochemical Engineering Journal  (Biochemical Engineering Journal)
巻： 81  ページ： 8-14  発行年： 2013年12月15日 
JST資料番号： W1014A  ISSN： 1369-703X  資料種別： 逐次刊行物 (A)
記事区分： 原著論文  発行国： オランダ (NLD)  言語： 英語 (EN)

抄録/ポイント： 抗体と毒素領域の間の2-領域融合蛋白質を研究した。抗体領域は,蛋白質のより凝集を起こしやすい領域であることが示された。リフォールディングの間の凝集を抑制するために,中間体変性剤濃度で,抗体領域を,最初に再び折り畳んだに違いない。システムの実験的三状態の説明の熱力学によって導かれる,段階的再折り畳み過程は,技術的なリフォールディングの間,凝集を多く抑制することに,成功した。固有のターゲティング機構を持つ,組み換えイムノトキシンは,癌および他の病気の治療のための潜在的応用能力を有する。即ち,しかし,それらの折畳み挙動は,しばしば十分に理解されなかった。更に,これは加工開発,製造および処方の間の,課題を示していた。生物学的毒素ペイロードに遺伝的に融合される,抗体変数領域(V_H/V_L)の折畳み熱力学は,pH6.0およびpH8.0で特徴づけられた。それは,折り重なる時間目盛りおよび凝集と折畳み間の競争と一緒に,相対的領域安定性を評価するためであった。毒素およびV_H/V_L領域は,かなり異なる非折り畳み自由エネルギー(Δg_UNF)を持っていた。そしてそれは,熱力学的に異なる,中間種に至った。更にそこで,毒素領域は折り畳まれず,V_H/V_Lは折り畳まれていた。中間体は,さまざまな変性剤濃度(約4-6Mの尿素;約2-4MのグアニジンHCl)にわたる,多数種であった。熱変性はpH8で毒素領域の可逆的アンフォールディングに帰着した。しかし,pH6で,熱変性は,V_H/V_L領域に対する不可逆アンフォールディングおよび凝集により,凝集に巻き込まれた。両方の領域の化学的アンフォールディングは,より容易に可逆的だった。それには,再折り畳みが段階的に起きたことを仮定した。そして,V_H/V_L領域の折畳みが,この抗体融合蛋白質の凝集に,重要な役割を果したので,中間体変性剤濃度で最初に折り畳みが起きることを可能にした。Copyright 2013 Elsevier B.V., Amsterdam. All rights reserved. Translated from English into Japanese by JST.

シソーラス用語： *変性 ,  *免疫毒素 ,  生物学 ,  回収 ,  タンパク質工学 ,  凝集 ,  熱力学 ,  自由エネルギー
準シソーラス用語： リフォールディング ,  生物物理化学 ,  蛋白質回収 ,  蛋白質折畳み ,  *蛋白質変性

分類 (2件)： 分子構造  (EB03020Y) ,  生物物理学一般  (EA02020O)

引用文献 (39件)：

• V. Kenanova, T. Olafsen, D.M. Crow, G. Sundaresan, M. Subbarayan, N.H. Carter, D.N. Ikle, PJ. Yazaki, A.F. Chatziioannou, S.S. Gambhir, L.E. Williams, J.E. Shively, D. Colcher, A.A. Raubitschek, A.M. Wu, Tailoring the pharmacokinetics and positron emission tomography imaging properties of anti-carcinoembryonic antigen single-chain F_v-F_c antibody fragments, Cancer Res. 65 (2005) 622-631.
• T. Olafsen, C. Cheung, PJ. Yazaki, L Li, G. Sundaresan, S.S. Gambhir, M.A. Sherman, L.E. Williams, J.E. Shively, A.A. Raubitschek, A.M. Wu, Covalent disulfide-linked anti-CEA diabody allows site-specific conjugation and radiolabeling for tumor targeting applications, Prot. Eng. Des. Sel. 17 (2004) 21-27.
• G.P. Adams, C.C. Shaller, E. Dadachova, H.H. Simmons, E.M. Horak, A. Tesfaye, A.J.P. Kelin-Szanto, J.D. Marks, M.W. Breichbiel, L.M. Weiner, A single treatment of yttrium-90-labeled CHX-A"-C6.5 diabody inhibits the growth of established human tumor xenografts in immunodeficient mice, Cancer Res. 64 (2004) 6200-6206.
• JJ. Huistein, P.G. de Groot, K. Silence, A. Veyradier, R. Fijnheer, PJ. Lenting, A novel nanobody that detects the gain-of-function phenotype of von Willebrand factor in ADAMTS13 deficiency and von Willebrand disease type 2B, Blood 106 (2005) 3035-3042.
• A.L. Fink, Protein aggregation: folding aggregates, inclusion bodies and amyloid, Fold. Des. 3 (1998) R9-R23.

タイトルに関連する用語 (3件)： 組み換え ,  イムノトキシン ,  凝集