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J-GLOBAL ID：201402262052627555   整理番号：14A0206542

液体クロマトグラフィー-同位体希釈タンデム質量分析を使用したClostridium thermocellum中の水溶性細胞代謝産物の分離と定量

SEPARATION AND QUANTIFICATION OF WATER-SOLUBLE CELLULAR METABOLITES IN CLOSTRIDIUM THERMOCELLUM USING LIQUID CHROMATOGRAPHY-ISOTOPE DILUTION TANDEM MASS SPECTROMETRY

著者 (9件)： CUI Jiatao (Qingdao Inst. of Bioenergy and Bioprocess Technol., Chinese Acad. of Sci., Qingdao, CHN) ,  CUI Jiatao (Graduate School, Chinese Acad. of Sci., Beijing, CHN) ,  ZHANG Jingtao (Qingdao Inst. of Bioenergy and Bioprocess Technol., Chinese Acad. of Sci., Qingdao, CHN) ,  ZHU Xinshu (Qingdao Inst. of Bioenergy and Bioprocess Technol., Chinese Acad. of Sci., Qingdao, CHN) ,  ZHU Xinshu (Graduate School, Chinese Acad. of Sci., Beijing, CHN) ,  BAI Fali (Qingdao Inst. of Bioenergy and Bioprocess Technol., Chinese Acad. of Sci., Qingdao, CHN) ,  FENG Yingang (Qingdao Inst. of Bioenergy and Bioprocess Technol., Chinese Acad. of Sci., Qingdao, CHN) ,  GUAN Wenna (Qingdao Inst. of Bioenergy and Bioprocess Technol., Chinese Acad. of Sci., Qingdao, CHN) ,  CUI Qiu (Qingdao Inst. of Bioenergy and Bioprocess Technol., Chinese Acad. of Sci., Qingdao, CHN)
資料名： Analytical Letters  (Analytical Letters)
巻： 46  号： 16-18  ページ： 2767-2786  発行年： 2013年12月 
JST資料番号： B0926A  ISSN： 0003-2719  CODEN： ANALBP  資料種別： 逐次刊行物 (A)
記事区分： 原著論文  発行国： アメリカ合衆国 (USA)  言語： 英語 (EN)

抄録/ポイント： 液体クロマトグラフィー-同位体希釈タンデム質量分析(LC-ID-MS/MS)によるClostridium thermocellum中の水溶性細胞代謝産物の高感度で選択的な分離,定量法を開発し,バリデーションした。¹³C標識グルコースを炭素源として培養した大腸菌から抽出した代謝産物を¹³C標識内部標準物質を使用した。冷水で洗浄したC.thermocellumの培養細胞を液体窒素で凍結して¹³C標識細胞抽出液に再懸濁し,冷却抽出液で希釈したのち高圧細胞粗砕機で細胞を溶解した。溶解液を遠心分離して上清をLC-ID-MS/MSで分析した。アミノ酸はACQUITY UPLC HSS T3カラムと0.1%ギ酸水溶液(A液)-0.1%ギ酸含有アセトニトリル(B液),他の有機酸と9補因子はACQUITY UPLC BEH Amideカラムと10mMギ酸アンモニウム水溶液(A液)-アセトニトリル/200mMギ酸アンモニウム(95:5,B液)で傾斜溶離し,多重反応モニタリングで定量した。開発法により20アミノ酸,16有機酸,9補因子を検出し,34代謝産物が定量できた。分析種の濃度が5~10000から100~10000ng/mlの範囲で検量線は直線となり,検出限界は0.80~15.50ng/ml,相対標準偏差は<8.9%であった。開発法により野生型及びエタノール適応C.thermocellum株の34代謝産物が定量でき,C.thermocellumのエタノール適応と耐性機構の研究のための重要なメタボロミクスデータが得られた。

シソーラス用語： *Clostridium thermocellum ,  細胞 ,  *代謝産物 ,  水溶性 ,  定量分析 ,  生体成分分析 ,  *HPLC-MS分析 ,  タンデム質量分析 ,  *同位体希釈分析 ,  内部標準法 ,  解析 ,  主成分分析 ,  耐化学性 ,  アミノ酸 ,  有機酸 ,  補因子 ,  選択イオンモニタリング ,  GC-MS分析
準シソーラス用語： *HPLC-MS/MS分析 ,  エタノール耐性 ,  メタボローム ,  メタボロミクス ,  多重反応モニタリング

分類 (2件)： 有機化合物の各種分析  (CC08034J) ,  代謝と栄養  (EG03054K)

タイトルに関連する用語 (7件)： 液体クロマトグラフィー ,  同位体希釈 ,  タンデム質量分析 ,  Clostridium ,  性細胞 ,  代謝産物 ,  定量