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J-GLOBAL ID:201702229769509619   整理番号:17A1456726

植物形質転換のための2遺伝子の同時クローニングのための二重部位ゲートウェイクローニングシステム【Powered by NICT】

A dual-site gateway cloning system for simultaneous cloning of two genes for plant transformation
著者 (11件):
資料名:
巻: 92  ページ: 1-11  発行年: 2017年 
JST資料番号: D0931B  ISSN: 0147-619X  資料種別: 逐次刊行物 (A)
記事区分: 原著論文  発行国: オランダ (NLD)  言語: 英語 (EN)
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蛋白質及び蛋白質-蛋白質相互作用ネットワークの細胞内局在の解析は植物における多様な生物学的過程の分子的基礎を明らかにするために必須である。この目的のために,著者らはGatewayクローニング適合ベクター系,そしてそれは二部位(DS)ゲートウェイクローニングシステムはバイナリーベクターにおける二の発現カセットの簡単なクローニングを可能にし,植物細胞におけるそれらを同時に発現することを作成した。DS Gatewayクローニング系では,(i)局所化解析のための非常に適した,中程度の構成ノパリンシンターゼプロモーター(Pnos)は各発現カセットを導くのに使用される,(ii)異なる植物の抵抗性マーカーとベクトルの四シリーズを確立し,(iii)6蛍光蛋白質と7エピトープ標識を有するN末端融合が利用できる,(iv)分割増強黄色蛍光蛋白質(EYFP)を用いて両N及びC末端融合した二分子蛍光相補性(BiFC)アッセイを用いた蛋白質-蛋白質相互作用の効率的検出に対して可能である。DSゲートウェイクローニングシステムの有用性は,発現の解析とA.thalianaを用いた安定発現系における二ゴルジ蛋白質の細胞内局在性パターンにより,ネギ,根菜類とA.thalianaを用いた一過性および安定発現系の両方でコート蛋白質複合体II(COPII)のサブユニット間の相互作用の分析により実証した。DSゲートウェイクローニングシステムは遺伝子機能分析における多目的で効率的な発現ツールを提供し,生きた植物細胞における二--蛋白質の相互作用と細胞内局在を調べるために特に適している。Copyright 2017 Elsevier B.V., Amsterdam. All rights reserved. Translated from English into Japanese by JST.【Powered by NICT】
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分類 (2件):
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遺伝子の構造と化学  ,  遺伝子操作 
タイトルに関連する用語 (3件):
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