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J-GLOBAL ID:201702260805118375   整理番号:17A2004985

3,4-ジヒドロキシフェニルアラニンデカルボキシラーゼと3,4-ジヒドロキシフェニルアセトアルデヒド合成酵素反応を識別する残基の生化学的同定【Powered by NICT】

Biochemical identification of residues that discriminate between 3,4-dihydroxyphenylalanine decarboxylase and 3,4-dihydroxyphenylacetaldehyde synthase-mediated reactions
著者 (4件):
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巻: 91  ページ: 34-43  発行年: 2017年 
JST資料番号: D0873A  ISSN: 0965-1748  資料種別: 逐次刊行物 (A)
記事区分: 原著論文  発行国: イギリス (GBR)  言語: 英語 (EN)
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利用可能な昆虫ゲノムでは,いくつかのL-3,4-ジヒドロキシフェニルアラニン(L-ドーパ)デカルボキシラーゼ(DDC)様または芳香族アミノ酸デカルボキシラーゼ(AAAD)配列である。はただ一つのDDCを含むそのゲノム哺乳類のものと対照的である。われわれの以前の実験はショウジョウバエから二DDC様蛋白質は酸素の存在下におけるドーパの複雑な脱炭酸酸化的脱アミノ過程を仲介する実際に確立し,3,4-ジヒドロキシフェニルアセトアルデヒド(DHPA),CO_2,NH_3,H_2O_2の形成をもたらした。これは典型的なDDC触媒反応,CO_2とドーパミンを産生すると対照的である。これらDDC様蛋白質は昆虫軟クチクラ形成におけるその重要な役割に基づくDHPAシンターゼと命名された任意にした。これらAAAD様蛋白質により触媒される反応の確立は長年研究者を困惑がパズルを解決したが,昆虫AAADファミリーにおけるDDCから真のDHPAシンターゼを語ると高い配列類似性のために問題となっている。本研究では,DHPAシンターゼとDDC間の広範な構造的および生化学的比較を行った。これらの比較は,DDC触媒およびDHPAシンターゼ触媒反応を決定する潜在的にいくつかの標的残基を同定した。,特に活性部位における残基,典型的なDDC蛋白質の結晶構造を持つDHPAシンターゼ相同性モデルの比較は,これらの同定された標的残基が果たす役割のさらなる洞察を提供した。それらの対応する変異体の標的残基と活性評価のその後の部位特異的変異誘発は活性部位His192とAsn192はDDCとDHPAシンターゼ触媒反応に必須である特徴的な残基であることを決定した。酸素はDHPAに媒介されるプロセスに必要である,この酸化剤はプロセスにおけるH_2O_2に減少した。生化学的評価は,DHPAに媒介される過程で形成された,H_2O_2を酸化剤として再利用することができ,この活性酸素種はH_2O;に還元されることを確立したH_2O_2により酸化ストレスを回避した。我々の構造的及び機能的分析の結果は,DHPAに媒介される反応に関与する機構の合理的な説明を提供する。重要な活性部位残基Asn192に基づいて,ショウジョウバエDHPAシンターゼで同定された,は主にDDC配列から全ての利用可能な昆虫DHPAシンターゼを識別することができた。Copyright 2018 Elsevier B.V., Amsterdam. All rights reserved. Translated from English into Japanese by JST.【Powered by NICT】
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