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J-GLOBAL ID：201702277501892319   整理番号：17A0992498

組換蛋白質の単離のためのEscherichia coliを溶解する迅速かつ効率的にする新しい方法【Powered by NICT】

Novel method to rapidly and efficiently lyse Escherichia coli for the isolation of recombinant protein

著者 (2件)： Joshi Himanshu (Microbiology and Molecular Biology Laboratory, Department of Biological Sciences, Indian Institute of Science Education and Research (IISER), Bhopal, India) ,  Jain Vikas (Microbiology and Molecular Biology Laboratory, Department of Biological Sciences, Indian Institute of Science Education and Research (IISER), Bhopal, India)
資料名： Analytical Biochemistry  (Analytical Biochemistry)
巻： 528  ページ： 1-6  発行年： 2017年 
JST資料番号： H0177B  ISSN： 0003-2697  資料種別： 逐次刊行物 (A)
記事区分： 原著論文  発行国： オランダ (NLD)  言語： 英語 (EN)

抄録/ポイント： いくつかの未特性化蛋白質の構造と機能を探索するために必要とされる迅速かつハイスループット蛋白質精製法。Escherichia coli株BL21(DE3)で発現した組換蛋白質の単離は効率的で迅速な細菌細胞溶解,蛋白質精製中のボトルネックと考えられるに大きく依存する。細胞は通常,超音波処理または高圧均質化により溶解されるのは遅く,特別な装置を必要とし,熱生成をもたらし,蛋白質の生物学的活性の損失をもたらす可能性がある。はE.coli,迅速であり,分離した蛋白質の高収率をもたらすを溶解する新しい方法を報告した。,ミコバクテリオファージD29エンドリシンのリゾチームドメイン(LD)の細胞内発現を行った。クロロホルムは細菌細胞膜を透過性化処理し,ペプチドグリカン層後者の分解は細胞溶解を起こすLDの拡散を可能にすることを培養培地に添加されるまでLDは無毒である。著者らの方法は,E.coli短時間を溶解した。概念実証として,大腸菌RNAポリメラーゼとGFPのαサブユニットの大規模単離と精製を示し,LDと共発現した。は,この方法が高スループットと同様に大規模蛋白質分離実験で容易に採用されると考えられる。Copyright 2017 Elsevier B.V., Amsterdam. All rights reserved. Translated from English into Japanese by JST.【Powered by NICT】

シソーラス用語： キャラクタリゼーション ,  *組換タンパク質 ,  RNAポリメラーゼ ,  生物活性 ,  *タンパク質 ,  *溶解 ,  細胞膜 ,  *単離 ,  リゾチーム ,  *大腸菌 ,  ペプチドグリカン
準シソーラス用語： エンドリシン ,  細胞溶解 ,  蛋白質精製 ,  ハイスループット , 【Automatic Indexing@JST】

著者キーワード (6件)： 迅速溶解 ,  リゾチーム ,  組換蛋白質 ,  蛋白質の精製 ,  二重発現 ,  膜透過性

分類 (1件)： 遺伝子操作  (EC02050B)

タイトルに関連する用語 (4件)： 組換蛋白質 ,  単離 ,  Escherichia ,  溶解