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J-GLOBAL ID：201702291194822872   整理番号：17A1184262

ヘパリンと精子前処理とLグルタチオン,雌雄鑑別,および二重凍結保存ウシにおける卵細胞質内精子注入を改善する【Powered by NICT】

Sperm pretreatment with heparin and l-glutathione, sex-sorting, and double cryopreservation to improve intracytoplasmic sperm injection in bovine

著者 (8件)： Canel Natalia Gabriela (Laboratorio de Biotecnologia Animal, Facultad de Agronomia, Universidad de Buenos Aires-CONICET, Av. San Martin 4453, P.C. 1417, Buenos Aires, Argentina) ,  Bevacqua Romina Jimena (Laboratorio de Biotecnologia Animal, Facultad de Agronomia, Universidad de Buenos Aires-CONICET, Av. San Martin 4453, P.C. 1417, Buenos Aires, Argentina) ,  Hiriart Maria Ines (Laboratorio de Biotecnologia Animal, Facultad de Agronomia, Universidad de Buenos Aires-CONICET, Av. San Martin 4453, P.C. 1417, Buenos Aires, Argentina) ,  Rabelo Natana Chaves (Universidade Federal de Juiz de Fora, Embrapa Gado de Leite, Rua Eugenio do Nascimento 610, P.C. 36038-330, Minas Gerais, Brazil) ,  de Almeida Camargo Luiz Sergio (Universidade Federal de Juiz de Fora, Embrapa Gado de Leite, Rua Eugenio do Nascimento 610, P.C. 36038-330, Minas Gerais, Brazil) ,  Romanato Marina (Instituto de Biologia y Medicina Experimental (IBYME)-CONICET, Vuelta de Obligado 2490, P.C. 1428, Buenos Aires, Argentina) ,  de Calvo Lucrecia Pineiro (Instituto de Biologia y Medicina Experimental (IBYME)-CONICET, Vuelta de Obligado 2490, P.C. 1428, Buenos Aires, Argentina) ,  Salamone Daniel Felipe (Laboratorio de Biotecnologia Animal, Facultad de Agronomia, Universidad de Buenos Aires-CONICET, Av. San Martin 4453, P.C. 1417, Buenos Aires, Argentina)
資料名： Theriogenology  (Theriogenology)
巻： 93  ページ： 62-70  発行年： 2017年 
JST資料番号： A1189A  ISSN： 0093-691X  資料種別： 逐次刊行物 (A)
記事区分： 原著論文  発行国： オランダ (NLD)  言語： 英語 (EN)

抄録/ポイント： ウシでは,卵細胞質内精子注入法(ICSI)は低レベルの精子脱凝縮のために部分的に非効率的である。本研究の目的は,ヘパリン(Hep)とL-グルタチオン(GSH)で前処理した正常サイズ精子,性選別精子の使用,精子凍結/解凍(再凍結)の二重円形,またはこれらの手法の組合せの注入はウシにおけるICSI後の精子脱凝縮と胚発生を改善できるかどうかを決定することであった。卵割率や胚盤胞率は2日目と7日後のICSIで評価した。ICSI胚盤胞の品質は,qPCRによる四遺伝子とTUNELアッセイによるDNA断片化指数の相対的発現により解析した。すべての測定で,精液試料は,ICSI前pCX EGFP50ng/μlと共培養した。,蛍光顕微鏡により検出される,GFP発現は,ICSI後の精子脱凝縮の有効性を評価するためのツールとして使用した。20H(Hep GSH)80μM Hep15mM GSHで前処理した正常な大きさの精子の使用は対照ICSI(35%,4.9%および20%)(p<0.05)と比較して,卵割,胚盤胞とEGFP+胚盤胞速度(60.8%,19.4%と61.9%)を増加させた。さらに,HMGN1,GLUT5,AQP3とPOU5F1の転写レベルは,ICSI Hep GSHとIVF胚の間で異ならなかった。性選別精子(X, Y)の使用は,非分類群(50.9および15.1%)と比較して4日(ICSIのためのICSI Yと83.2及び31.7%の83と30.2%X)での卵割率およびEGFP発現を改善し,胚盤胞期で差がないことを示した。最後に,雌雄鑑別(X)はH GSHおよび/または再凍結処理と組み合わせた。Hep GSHの使用はICSI X再凍結群(80.4% vs. 94.2%)とICSI X群(3.3% vs. 10%)から胚盤胞発生からの開裂速度を減少させ,それらの対照(p<0.05)と比較した。Hep GSH前処理は4日目に低い導入遺伝子発現を誘導したが,差異はICSI群(58.3~80%)の間の胚盤胞期では見られなかった。TUNELアッセイは,ICSI X Hep GSHを除く全てのICSI処理(p<0.05)のための高いDNA断片化指数IVF X対照と違わなかったを示した。結論として,Hep GSH,雌雄鑑別と組み合わせた,フローサイトメトリーによるで前処理した正常な大きさの精子の使用は,ウシにおけるICSI転帰を改善することができた。Copyright 2017 Elsevier B.V., Amsterdam. All rights reserved. Translated from English into Japanese by JST.【Powered by NICT】

シソーラス用語： フローサイトメトリー ,  蛍光顕微鏡 ,  品質 ,  卵割 ,  定量的PCR法 ,  *凍結 ,  *精子 ,  精液 ,  *凍結保存 ,  遺伝子 ,  *前処理 ,  共培養 ,  胚盤胞 ,  TUNEL法 ,  脂肪族アミン ,  チオール ,  脂肪族カルボン酸 ,  トリペプチド ,  含硫アミノ酸

著者キーワード (5件)： ICSI ,  ウシ ,  pCX EGFP ,  性選別精子 ,  精子前処理

分類 (2件)： 繁殖管理  (FD01030C) ,  牛  (FD02020Y)

物質索引 (1件)： グルタチオン

タイトルに関連する用語 (8件)： ヘパリン ,  精子 ,  前処理 ,  グルタチオン ,  雌雄鑑別 ,  凍結保存 ,  ウシ ,  卵細胞質内精子注入