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J-GLOBAL ID：201802211314262798   整理番号：18A1106082

ブタ卵母細胞におけるゲノム編集効率に影響する重要因子としての活性化後のCRISPR/Cas9関連mRNAマイクロインジェクションのタイミング【JST・京大機械翻訳】

Timing of CRISPR/Cas9-related mRNA microinjection after activation as an important factor affecting genome editing efficiency in porcine oocytes

著者 (11件)： Sato Masahiro (Section of Gene Expression Regulation, Frontier Science Research Center, Kagoshima University, Kagoshima 890-8544, Japan) ,  Kosuke Maeda (Laboratory of Animal Reproduction, Faculty of Agriculture, Kagoshima University, Kagoshima 890-0065, Japan) ,  Koriyama Miyu (Laboratory of Animal Reproduction, Faculty of Agriculture, Kagoshima University, Kagoshima 890-0065, Japan) ,  Inada Emi (Department of Pediatric Dentistry, Graduate School of Medical and Dental Sciences, Kagoshima University, Kagoshima 890-8544, Japan) ,  Saitoh Issei (Division of Pediatric Dentistry, Department of Oral Health Sciences, Course for Oral Life Science, Graduate School of Medical and Dental Sciences, Niigata University, Niigata 951-8514, Japan) ,  Ohtsuka Masato (Division of Basic Molecular Science and Molecular Medicine, School of Medicine, Tokai University, Kanagawa 259-1193, Japan) ,  Ohtsuka Masato (The Institute of Medical Sciences, Tokai University, Kanagawa 259-1193, Japan) ,  Nakamura Shingo (Division of Biomedical Engineering, National Defense Medical College Research Institute, Saitama 359-8513, Japan) ,  Sakurai Takayuki (Basic Research Division for Next-Generation Disease Models and Fundamental Technology, Research Center for Next Generation Medicine, Shinshu University, Nagano 390-8621, Japan) ,  Watanabe Satoshi (Animal Genome Research Unit, Division of Animal Science, National Institute of Agrobiological Sciences, Ibaraki 305-8602, Japan) ,  Miyoshi Kazuchika (Laboratory of Animal Reproduction, Faculty of Agriculture, Kagoshima University, Kagoshima 890-0065, Japan)
資料名： Theriogenology  (Theriogenology)
巻： 108  ページ： 29-38  発行年： 2018年 
JST資料番号： A1189A  ISSN： 0093-691X  資料種別： 逐次刊行物 (A)
記事区分： 原著論文  発行国： オランダ (NLD)  言語： 英語 (EN)

抄録/ポイント： 最近,ブタ接合体へのCRISPR/Cas9関連mRNA成分のマイクロインジェクションによる一段階ゲノム編集の成功が報告されている。比較的長い妊娠期間と高コストの住宅ブタを考えると,効果的なマイクロインジェクションベースのブタゲノム編集法の確立が緊急に必要である。以前に,α-Galエピトープを合成するα-1,3-ガラクトシルトランスフェラーゼ(GGTA1)をコードする遺伝子を破壊することを試みた。それは,CRISPR/Cas9関連核酸をマイクロインジェクションし,電気活性化直後にブタ卵母細胞に緑色蛍光蛋白質(EGFP)mRNAを増強した。得られた胚盤胞はモザイクで,修飾細胞の頻度は低い(50%)が,ゲノム編集は実際に誘導されることを見出した。ブタ卵母細胞におけるゲノム編集効率を改善するために,細胞質注入を電気的活性化の6時間後に行い,前核が形成された。発生中の胚盤胞はより高いレベルのEGFPを示した。さらに,T7エンドヌクレアーゼ1アッセイとそれに続く配列決定は,これらの胚がゲノム編集効率(69%)を増加させることを示したが,誘導された突然変異に対する高度のモザイク性がまだ観察された。蛍光標識されたイソレクチンBS-I-B_4による単一割球ベースの細胞化学的染色もこのモザイク現象を確認した。したがって,このようなモザイク現象を避けるか減少させる技術の開発は,マイクロインジェクションによる効率的なノックアウト子豚生産のための重要な要因であろう。Copyright 2018 Elsevier B.V., Amsterdam. All rights reserved. Translated from English into Japanese by JST.【JST・京大機械翻訳】

シソーラス用語： モザイク性 ,  蛍光標識 ,  エピトープ ,  エンドヌクレアーゼ ,  *mRNA ,  遺伝子 ,  ガラクトシルトランスフェラーゼ ,  細胞質 ,  胚盤胞 ,  *卵母細胞 ,  *マイクロインジェクション ,  突然変異
準シソーラス用語： 割球 ,  *Cas9 ,  *ゲノムエディティング , 【Automatic Indexing@JST】

著者キーワード (9件)： α-Galエピトープ ,  α-1,3-ガラクトシルトランスフェラーゼ ,  CRISPR/Cas9 ,  マイクロインジェクション ,  mRNA ,  モザイク現象 ,  バイアレルKO ,  INDELS ,  イソレクチンBS-I-B_4

分類 (1件)： 遺伝子操作  (EC02050B)

タイトルに関連する用語 (9件)： ブタ ,  卵母細胞 ,  ゲノム編集 ,  因子 ,  活性化 ,  CRISPR ,  Cas9 ,  mRNA ,  マイクロインジェクション