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J-GLOBAL ID:201802225326656924   整理番号:18A1211411

アルギン酸同化細菌Flavobacterium sp.株UMI-01における2-ケト-3-デオキシ-D-グルコナートキナーゼと2-ケト-3-デオキシ-D-ホスホグルコン酸アルドラーゼの同定【JST・京大機械翻訳】

Identification of 2-keto-3-deoxy-d-Gluconate Kinase and 2-keto-3-deoxy-d-Phosphogluconate Aldolase in an Alginate-Assimilating Bacterium, Flavobacterium sp. Strain UMI-01
著者 (3件):
資料名:
巻: 15  号:ページ: 37  発行年: 2017年 
JST資料番号: U7236A  ISSN: 1660-3397  資料種別: 逐次刊行物 (A)
記事区分: 原著論文  発行国: スイス (CHE)  言語: 英語 (EN)
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最近,BacteroidetesのメンバーであるFlavobacterium sp.株UMI-01のゲノムにおけるアルギン酸同化遺伝子クラスターを同定した。クラスタにおけるアルギン酸リアーゼ遺伝子と4-デオキシ-L-erythro-5-ヘキソース酸(DEH)レダクターゼ遺伝子は既に特性化されている。しかしながら,2-ケト-3-デオキシ-D-グルコナート(KDG)キナーゼおよび2-ケト-3-デオキシ-6-ホスホグルコン酸(KDPG)アルドラーゼ遺伝子,すなわち,flkinおよびflaldはまだ特性化されていない。flkinとflaldから推定されたアミノ酸配列は,Proteobacteriaのメンバー(Kimら,Process Biochem,2016)というSaccharoophus dystans 2-40Tの対応する酵素のそれらと低い同一性を示した。これはBacteroidetes種のDEH同化酵素がProteobacteria種のそれらからいくらか逸脱していると考えた。したがって,本研究では,最初に,菌株UMI-01のKDGキナーゼおよびKDGアルドラーゼの一次構造における特性を評価し,大腸菌発現系によって発現された組換え酵素,recFlKinおよびrecFlAldの酵素的性質を調べた。いくつかのProteobacteriaとBacteroidetes種からのKDGキナーゼとKDGアルドラーゼ間の多重配列アラインメントは,菌株UMI-01酵素がProteobacteria酵素とかなり低い配列同一性(15%~25%)を示したが,Bacteroidetes酵素と比較的高い同一性(47%~68%)を示した。これらの酵素に対する系統発生分析は,Proteobacteria酵素とBacteroidetes酵素の間の遠い関係を示した。すなわち,遺伝子flkinとflaldにより生産された系統樹においてそれぞれ異なるクラスターを形成し,KDGキナーゼとKDPGアルドラーゼ活性を示すことを確認した。すなわち,recFlKinは2.5mMのKDGと2.5mMのATPを含む反応混合物中で90分の反応で1.7mMのKDPGを生成したが,recFlAldは平衡状態で5mMのKDPGを含む反応混合物中で1.2mMのピルビン酸を生成した。recFlKin,recFlAld,および以前に報告されたアルギン酸リアーゼおよびUMI-01株のDEHレダクターゼから構築されたin vitroアルギン酸代謝系は,アルギン酸をピルビン酸およびグリセルアルデヒド-3-ホスファートに38%の効率で変換できた。Copyright 2018 The Author(s) All rights reserved. Translated from English into Japanese by JST.【JST・京大機械翻訳】
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