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J-GLOBAL ID:201802229043770681   整理番号:18A1514216

転写因子駆動ヒト分泌アルカリ性ホスファターゼ発現を安定に維持する新規レポーター細胞の確立【JST・京大機械翻訳】

Establishment of Novel Reporter Cells Stably Maintaining Transcription Factor-driven Human Secreted Alkaline Phosphatase Expression
著者 (9件):
資料名:
巻: 19  号:ページ: 224-231  発行年: 2018年 
JST資料番号: W3611A  ISSN: 1389-2010  資料種別: 逐次刊行物 (A)
記事区分: 原著論文  発行国: 不明 (ARE)  言語: 英語 (EN)
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背景:転写調節は,無数の生物学的反応において非常に重要で重要な機能である。したがって,転写活性を決定する方法は,基礎医学研究だけでなく創薬においても必要である。宿主細胞複製に同期した構築物を維持できる,ヒト分泌胚性アルカリホスファターゼ(SEAP)とEpstein-Barrウイルス核抗原(EBNA)1を用いた新規レポーター構築物を確立した。方法:核因子カッパB(NFkB)またはインターフェロン調節因子(IRF)駆動SEAP発現構築物を確立し,それらを培養細胞に導入した。【結果】細胞は,培養において長期間レポーター構築物を維持し,リポ多糖類(LPS)およびインターフェロンβのような各特異的リガンドに応答して,SEAPを培養上清に産生する。化学ルミネセンスによるSEAPの測定は,96及び384ウェルフォーマットの両方における薬物発見におけるハイスループットスクリーニングに適用される高い標準ダイナミックレンジを得ることを可能にする。また,発現プラスミドでトランスフェクションした細胞における転写活性を決定するために,あるいは種々のToll様受容体(TLR)リガンドで処理した細胞において,濃度依存的に時間依存的に転写活性を測定することもできる。最後に,多数の天然産物ライブラリーを用いた薬物スクリーニングを示した。【結論】著者らは,最初に,2つの新規レポーター細胞を確立し,薬物スクリーニングを実施するために,それらの品質と精度を検証した。Copyright 2018 Bentham Science Publishers All rights reserved. Translated from English into Japanese by JST.【JST・京大機械翻訳】
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, 【Automatic Indexing@JST】
分類 (5件):
分類
JSTが定めた文献の分類名称とコードです
バイオアッセイ  ,  生体防御と免疫系研究法  ,  遺伝子操作  ,  生物科学研究法一般  ,  遺伝子発現 

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