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J-GLOBAL ID：201802246602337090   整理番号：18A0522272

蛍光相関分光法を用いた溶液中のコラーゲン特異的分子シャペロンH SP47の基質結合の検出【Powered by NICT】

Detection of substrate binding of a collagen-specific molecular chaperone HSP47 in solution using fluorescence correlation spectroscopy

著者 (15件)： Kitamura Akira (Laboratory of Molecular Cell Dynamics, Faculty of Advanced Life Science, Hokkaido University, Sapporo, Japan) ,  Kitamura Akira (Department of Molecular and Cellular Biology, Institute for Frontier Medical Sciences, Kyoto University, Kyoto, Japan) ,  Ishida Yoshihito (Department of Molecular and Cellular Biology, Institute for Frontier Medical Sciences, Kyoto University, Kyoto, Japan) ,  Kubota Hiroshi (Department of Molecular and Cellular Biology, Institute for Frontier Medical Sciences, Kyoto University, Kyoto, Japan) ,  Kubota Hiroshi (Department of Life Science, Faculty of Engineering Science, Akita University, Japan) ,  Pack Chan-Gi (Laboratory of Molecular Cell Dynamics, Faculty of Advanced Life Science, Hokkaido University, Sapporo, Japan) ,  Homma Takayuki (Department of Molecular and Cellular Biology, Institute for Frontier Medical Sciences, Kyoto University, Kyoto, Japan) ,  Ito Shinya (Department of Molecular and Cellular Biology, Institute for Frontier Medical Sciences, Kyoto University, Kyoto, Japan) ,  Ito Shinya (Faculty of Life Science, Kyoto Sangyo University, Japan) ,  Araki Kazutaka (Department of Molecular and Cellular Biology, Institute for Frontier Medical Sciences, Kyoto University, Kyoto, Japan) ,  Kinjo Masataka (Laboratory of Molecular Cell Dynamics, Faculty of Advanced Life Science, Hokkaido University, Sapporo, Japan) ,  Nagata Kazuhiro (Department of Molecular and Cellular Biology, Institute for Frontier Medical Sciences, Kyoto University, Kyoto, Japan) ,  Nagata Kazuhiro (Faculty of Life Science, Kyoto Sangyo University, Japan) ,  Nagata Kazuhiro (Institute for Protein Dynamics, Kyoto Sangyo University, Japan) ,  Nagata Kazuhiro (Core Research for Evolutional Science and Technology (CREST), Japan Science and Technology Agency, Japan)
資料名： Biochemical and Biophysical Research Communications  (Biochemical and Biophysical Research Communications)
巻： 497  号： 1  ページ： 279-284  発行年： 2018年 
JST資料番号： B0118A  ISSN： 0006-291X  資料種別： 逐次刊行物 (A)
記事区分： 原著論文  発行国： オランダ (NLD)  言語： 英語 (EN)

抄録/ポイント： ERとコラーゲン特異的分子シャペロンである熱ショック蛋白質47kDa(H SP47)はコラーゲン疎水性アミノ酸配列(Gly-Pro-Hyp)と正しく折畳まれたコラーゲンの分泌における支援を認識する。上昇コラーゲン産生は各種疾患におけるH SP47発現,線維症およびケロイドを含むと相関していた。H SP47ノックダウンは,コラーゲン分泌を阻害することにより肝線維症を改善し,プロコラーゲンとH SP47の相互作用の阻害は,コラーゲン分泌を抑制した。,H SP47とコラーゲンの間の相互作用を阻害する薬物のスクリーニングのためのハイスループットシステムが線維性疾患のための新規治療法の開発を助けるであろう。本研究では,蛍光相関分光法(FCS)を用いた溶液中のH SP47とコラーゲン間の相互作用を測定する迅速かつ定量的に簡単な方法を確立した。緑色蛍光染料アレクサフルオル488(HSP47 AF)で標識したH SP47の拡散速度は,IまたはIII型コラーゲンの添加が,染料標識蛋白質ジスルフィドイソメラーゼ(PDI)またはウシ血清アルブミン(BSA)のそれはそうではなかったで減少し,コラーゲンとH SP47の特異的結合は,FCSを用いて検出できることを示した。この方法を用いて,H SP47とコラーゲンの間の相互作用の解離定数を計算した。H SP47AFとコラーゲンとの間の結合比は塩化ナトリウムの存在下で変化し,相互作用は本質的に疎水性であることを確認しなかった。添加では,中性pHへの回復後の低pHと再結合におけるH SP47のコラーゲンの解離を観測した。これらの観察は,このシステムはH SP47とコラーゲンの間の相互作用を検出するための適切なであり,抑制および/または硬化線維症の可能な薬のためのハイスループットスクリーニングに適用できることを示した。Copyright 2018 Elsevier B.V., Amsterdam. All rights reserved. Translated from English into Japanese by JST.【Powered by NICT】

シソーラス用語： 解離定数 ,  染料 ,  治療法 ,  *シャペロンタンパク質 ,  分泌 ,  塩化ナトリウム ,  *基質 ,  相互作用 ,  熱ショックタンパク質 ,  *コラーゲン ,  疎水性 ,  ウシ血清アルブミン ,  プロコラーゲン ,  *蛍光相関分光法 ,  III型コラーゲン ,  *硬タンパク質 ,  *動物タンパク質
準シソーラス用語： コラーゲンIII , 【Automatic Indexing@JST】

著者キーワード (4件)： 分子シャペロン ,  H SP47 ,  コラーゲン ,  蛍光相関分光法

分類 (1件)： 細胞構成体の機能  (EF03060C)

タイトルに関連する用語 (5件)： 蛍光相関分光法 ,  溶液 ,  コラーゲン ,  分子シャペロン ,  基質