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J-GLOBAL ID:201802248085480029   整理番号:18A1436815

地衣芽胞菌HS10原形質電気転化体系の研究【JST・京大機械翻訳】

Studies on the electroporation system for Bacillus licheniformis HS10 protoplast
著者 (3件):
資料名:
巻: 44  号:ページ: 117-123  発行年: 2018年 
JST資料番号: C2147A  ISSN: 0529-1542  資料種別: 逐次刊行物 (A)
記事区分: 原著論文  発行国: 中国 (CHN)  言語: 中国語 (ZH)
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BacilluslicheniformisHS10とその粗蛋白質は,多くの病原真菌に対して防除効果を持ち,その生物的防除機能遺伝子の発見に役立っている。本研究では、プロトプラストの調製、再生培地、浸透圧安定剤、電気衝撃パラメータなどの実験条件を最適化することにより、地衣芽胞菌HS10プロトプラストの電気転化法を確立した。結果は,最適条件が以下の通りであることを示した。10時間の培養後,対数増殖期の菌体を4倍に濃縮し,最終濃度1mg/mLのリゾチームを用いて,37°C,150r/minで20分間加水分解した。酵素分解効率は99.34%に達し,1×SMMは3回洗浄し,細菌濃度は1.0×108cfu/mLに達し,1.6kV,5msの電気衝撃の後,3回の操作後に,3回の培養後に,最高の効率を得た。迅速にSMMP溶液で100r/min、37°Cで610時間回復し、KanとErmを含む再生培地DM3平板に塗布した。プラスミドpMarA(8253bp)と遺伝子ノックアウトプラスミドpMADΔCP(13043bp)を,突然変異体ライブラリーからのプラスミドpMADΔCP(13043bp)に形質転換した。37cfu/μgDNAと10cfu/μgDNA陽性形質転換体を得た。遺伝的形質転換系は,BacilluslicheniformisHS10における遺伝子機能の研究のための技術的支援を提供した。Data from Wanfang. Translated by JST.【JST・京大機械翻訳】
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遺伝子操作 
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