抄録/ポイント:
抄録/ポイント
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本研究の目的は,ウシ乳腺上皮細胞(BMECs)における乳蛋白質合成関連の遺伝子発現と蛋白質リン酸化に及ぼすリジン(Lys)の効果を研究することであり,そして,乳蛋白質合成に及ぼすLysの影響の機構を研究することである。第3世代のBMECsをランダムに6グループに分け、各グループの培地中のLysの濃度はそれぞれ0.5(対照)、1.0、2.0、4.0、8.0と16.0mmol/Lで、各グループごとに6回繰り返した。37°C,5%CO2で48時間培養後,BMECsのアデノシン三リン酸(ATP)の濃度を化学発光法によって測定した。乳蛋白質合成関連の遺伝子発現をリアルタイム蛍光定量PCRによって測定し,蛋白質合成関連蛋白質のリン酸化をウェスタンブロット法によって測定した。その結果;Lys濃度の増加に伴い、ATP含有量は顕著な二次曲線上昇を呈した(P=0.050)。κ-カゼイン(CSN3)(P=0.093),哺乳類ラパマイシン標的蛋白質(mTOR)(P=0.005),真核開始因子4E(eIF4E)(P=0。076)とリン酸アデノシン活性化蛋白質キナーゼα1(AMPKα1)の遺伝子発現量(P=0.045)は、顕著な二次曲線変化を示し、いずれも最初上昇し、その後低下した。α-カゼイン(CSN1S1)の遺伝子発現量(P=0.081)及びmTOR(P=0.038)とp70リボソームタンパク質S6キナーゼ1(S6K1)のリン酸化レベル(P=0.022)は顕著な或いは顕著な一次線形低下を示した。ホスホアデノシン活性化蛋白質キナーゼ(AMPK)のリン酸化レベルは,一次的に直線的に増加した(P=0.014)。分散分析の結果,LysはATP含有量,乳蛋白質合成関連遺伝子発現量およびeIF4Eリン酸化レベル(P<0.05)に有意な影響を及ぼし,ATP含有量は2.016.0mmol/L群,CSN1S1群であった。β-カゼイン(CSN2),シグナル伝達および転写活性化因子5(STAT5)の遺伝子発現は1.02.0mmol/Lで,mTOR遺伝子発現は1.08.0mmol/Lで,CSN3遺伝子発現は1.04であった。0mmol/Lのグループで,チロシンキナーゼ2(JAK2)遺伝子発現は1.016.0mmol/Lで,S6K1遺伝子発現は2.0mmol/Lで,eIF4E遺伝子発現は2.08.0mmol/Lであった。CSN1S1,CSN3,STAT5,およびmTORの遺伝子発現は,2.04.0mmol/LのeIF4Eの濃度において,16.0mmol/L群で,抑制され,1.016であった。0mmol/L群の4E結合蛋白質1(4EBP1)の遺伝子発現は阻害された。要するに、Lys濃度が1.02.0mmol/Lの時、BMECs内の乳タンパク合成関連遺伝子発現の促進効果が良好である。Data from Wanfang. Translated by JST.【JST・京大機械翻訳】