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J-GLOBAL ID:201802260112462311   整理番号:18A0923610

Ruminiclostriodium josuiの効率的な宿主-ベクター系の開発【JST・京大機械翻訳】

Development of an efficient host-vector system of Ruminiclostridium josui
著者 (6件):
資料名:
巻: 58  号:ページ: 448-458  発行年: 2018年 
JST資料番号: T0359A  ISSN: 0233-111X  資料種別: 逐次刊行物 (A)
記事区分: 原著論文  発行国: アメリカ合衆国 (USA)  言語: 英語 (EN)
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Ruminiclostriidium jossui(以前Clostridium josii)は,厳密に嫌気性の中温性セルロース分解細菌であるが,固化生物処理を介したバイオマス利用の有望な候補であり,その宿主-ベクター系はまだ確立されていない。制限と修正システムの存在は,R.josuiの形質転換に対する重要な障壁である。ここでは,カラムクロマトグラフィーを用いてR.josii細胞抽出物から制限エンドヌクレアーゼRjoIを部分的に精製した。さらなる特性化は,RjoIがDpnIのアイソシゾマーであることを示し,AヌクレオチドがDam-メチル化されている配列5′-G~metATC-3′を認識した。RjoIはAとTヌクレオチド間の認識配列を切断し,鈍い末端を生成した。大腸菌C2925(ダム~-/dcm~-)から調製したプラスミドをエレクトロポレーションによりR.josuiに導入することに成功した。矩形波パルス(750V,1ms)を用いて,DNAの6.6×10~3形質転換体/μgの最大変換効率を得た。R.jossui Cel48A遺伝子を新たに開発したプラスミドpKKM801にクローン化されたdocerinコード領域の欠損をR.jossuiに導入した。RjCel48A,RjCel48AΔdocの短縮型は培養上清で検出されたが,細胞内画分では検出されなかった。これはR.josuiの分子育種のための基礎技術の確立に関する最初の報告である。Copyright 2018 Wiley Publishing Japan K.K. All Rights reserved. Translated from English into Japanese by JST.【JST・京大機械翻訳】
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分類 (2件):
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遺伝子操作  ,  分子遺伝学一般 
タイトルに関連する用語 (3件):
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