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J-GLOBAL ID:201802272523025299   整理番号:18A0420663

UnaGとカルモジュリンに基づいた二重配位子モジュール化可能な蛍光蛋白質【Powered by NICT】

A dual-ligand-modulable fluorescent protein based on UnaG and calmodulin
著者 (7件):
資料名:
巻: 496  号:ページ: 872-879  発行年: 2018年 
JST資料番号: B0118A  ISSN: 0006-291X  資料種別: 逐次刊行物 (A)
記事区分: 原著論文  発行国: オランダ (NLD)  言語: 英語 (EN)
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UnaGはそれのフルオロホアとして非抱合ビリルビン(BR)を利用した緑色蛍光蛋白質である。BRは生体膜における活性酸素種をスカベンジする重要な抗酸化剤として生理学者の注目を集めているが,その過剰な蓄積はいくつかの臨床症状を引き起こす。BR濃度の最適調節は老化の臨床治療での結果と同様に臨床症状のリスクを減少させるであろうが,UnaGはほとんどBR(K_D=98pM)に対する極端に高親和性のためにBRを放出する。ここでは,カルモジュリン(CaM)の遺伝的挿入によるCa~2+敏感であることUnaGのBR結合と蛍光を設計した。得られたUnaG/CaMハイブリッド蛋白質は二重リガンド調節蛍光蛋白質である蛍光配位子BRの結合は負の他の配位子,Ca~2+イオンにより調節される。BRへの親和性は三桁Ca~2+を含まない状態(K_D=9.70nM)とCa~2+飽和状態(K_D=9.65μM)の間で異なっていた。キメラ蛋白質はCa~2+制御によるBRのモルレベルナノへ放出することができ,その結果,BReleaCa(BR+放出+Ca~2+)と呼ばれる。このような蛋白質ハイブリダイゼーション法は,様々なリガンド誘導機能性蛋白質の配位子結合特性を変化させるために一般的に適用できるであろう。Copyright 2018 Elsevier B.V., Amsterdam. All rights reserved. Translated from English into Japanese by JST.【Powered by NICT】
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生物物理的研究法  ,  蛋白質・ペプチド一般 
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