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J-GLOBAL ID：201802278767343792   整理番号：18A0087675

相対的定量化N-グリカンの新規,単純化した戦略:変異酵素エンドM N175Qのグリコシル基転移反応による安定同位体標識によるエレクトロスプレイイオン化質量分析を用いた定量的グリコミクス【Powered by NICT】

A novel, simplified strategy of relative quantification N-glycan: Quantitative glycomics using electrospray ionization mass spectrometry through the stable isotopic labeling by transglycosylation reaction of mutant enzyme Endo-M-N175Q

著者 (10件)： Shi Qing (Key Laboratory for Natural Resource of Changbai Mountain & Functional Molecules, Ministry of Education, College of Pharmacy Yanbian University and Department of Pharmacy, Yanbian University Hospital, Yanji 133002, Jilin Province, China) ,  Hashimoto Ryugo (Laboratory of Analytical and Bio-Analytical Chemistry, School of Pharmaceutical Sciences, University of Shizuoka, 52-1 Yada, Suruga-ku, Shizuoka 422-8526, Japan) ,  Otsubo Tadamune (Department of Organic Chemistry, School of Pharmaceutical Sciences, Hiroshima International, University, Hiroshima, Japan) ,  Ikeda Kiyoshi (Department of Organic Chemistry, School of Pharmaceutical Sciences, Hiroshima International, University, Hiroshima, Japan) ,  Todoroki Kenichiro (Laboratory of Analytical and Bio-Analytical Chemistry, School of Pharmaceutical Sciences, University of Shizuoka, 52-1 Yada, Suruga-ku, Shizuoka 422-8526, Japan) ,  Mizuno Hajime (Laboratory of Analytical and Bio-Analytical Chemistry, School of Pharmaceutical Sciences, University of Shizuoka, 52-1 Yada, Suruga-ku, Shizuoka 422-8526, Japan) ,  Jin Dongri (Key Laboratory for Natural Resource of Changbai Mountain & Functional Molecules, Ministry of Education, College of Pharmacy Yanbian University and Department of Pharmacy, Yanbian University Hospital, Yanji 133002, Jilin Province, China) ,  Toyo’oka Toshimasa (Laboratory of Analytical and Bio-Analytical Chemistry, School of Pharmaceutical Sciences, University of Shizuoka, 52-1 Yada, Suruga-ku, Shizuoka 422-8526, Japan) ,  Jiang Zhe (Key Laboratory for Natural Resource of Changbai Mountain & Functional Molecules, Ministry of Education, College of Pharmacy Yanbian University and Department of Pharmacy, Yanbian University Hospital, Yanji 133002, Jilin Province, China) ,  Min Jun Zhe (Key Laboratory for Natural Resource of Changbai Mountain & Functional Molecules, Ministry of Education, College of Pharmacy Yanbian University and Department of Pharmacy, Yanbian University Hospital, Yanji 133002, Jilin Province, China)
資料名： Journal of Pharmaceutical and Biomedical Analysis  (Journal of Pharmaceutical and Biomedical Analysis)
巻： 149  ページ： 365-373  発行年： 2018年 
JST資料番号： H0876A  ISSN： 0731-7085  資料種別： 逐次刊行物 (A)
記事区分： 原著論文  発行国： オランダ (NLD)  言語： 英語 (EN)

抄録/ポイント： グリカンの定量的分析のための高感度で簡単な方法の欠如は,蛋白質グリコシル化パターン(グリコミクス)の探査,抗体薬物安定性の評価,疾患グリカンバイオマーカーのスクリーニングを妨げてきた。本研究では,斬新かつ単純化された定量的グリコミクス戦略を記述した。質量分析によるグリコシンターゼ(Endo M N175Q)トランスグリコシル化反応を介して正電荷構造の非重水素化(d0-)または重水素化(d8-)4-(2,4-ジニトロ-5-ピペラジン-1-イル-フェニル)-1,1-ジメチル-ピペラジン-1-イウム(MPDPZ)-Boc-アスパラギニル-N-アセチル-D-グルコサミン(Boc Asn GlcNAc)受容体とN-グリカンを標識するために変異体酵素反応安定同位体標識(QMERSIL)による定量を比較グリコミクスを容易にした。複合型のシアリルグリコペプチド(SGP)はQMERSILは大きさ3桁の線形ダイナミックレンジ(までd0/d8=0.02:20)以上の相対定量を促進することを実証した。QMERSIL法からN-グリカンピークの面積比は良好な直線性を示した(d0/d8,R~2=0.9999;d8/d0,R~2=0.9978)。再現性と精度分析精度は全て6.12%以下であり,ヒト血しょうに添加したSGPの平均回収率(%)は97.34%であった。さらに,LC-MS/MSを用いるQMERSILはリボヌクレアーゼB,ウシフェチュイン,及び卵白アルブミンからd0(d8)-MPDPZ Boc Asn GlcNAc標識グリカンの種々のモル比(1:1, 1:5, 5:1)で評価した。同位体MPDPZ Boc Asn GlcNAc標識化N-グリカン間の相対強度の比は理論値(1:1, 1:5, 5:1)に近いほぼ等しかった。最後に,この方法は,ヒトの血漿中のN-結合少糖類の相対定量的比較のために用いた。Copyright 2018 Elsevier B.V., Amsterdam. All rights reserved. Translated from English into Japanese by JST.【Powered by NICT】

シソーラス用語： 高感度 ,  標識法 ,  線形性 ,  *エレクトロスプレイイオン化質量分析 ,  定量的分析 ,  グリコシル化 ,  回収率 ,  酵素反応 ,  ヒト ,  重水素化 ,  再現性 ,  *グリカン ,  *グリコミクス ,  *N-グリカン ,  液体クロマトグラフィー-タンデム質量分析
準シソーラス用語： LC/MS/MS , 【Automatic Indexing@JST】

著者キーワード (6件)： N-グリカン ,  相対的定量化 ,  エンドM N175Q ,  安定同位体標識 ,  LC-ESI-MS ,  グリコミクス

分類 (1件)： 薬物の分析  (GV01040Q)

タイトルに関連する用語 (8件)： 定量化 ,  N-グリカン ,  戦略 ,  変異酵素 ,  安定同位体標識 ,  エレクトロスプレイイオン化質量分析 ,  定量 ,  グリコミクス